Vasa基因在同倍性鲫鲤中的研究.pdfVIP

㈣舢Ⅲ吣舢Ⅲ圳咖ⅢⅧl Y2149348 中文摘要 玩s口基因是DEAD-boX家族中的一员，它编码一种依赖A皿的 对妊解旋酶，在生殖细胞增殖和分化过程中发挥着重要作用。由于 v鲫口基因仅在许多生物的生殖系细胞中特异性表达，因此被广泛用 作研究生殖细胞的分子标记物，在动物生殖细胞发生和生殖调控等研 究中起到了重要的作用。 世界上首次培育成功的两性可育异源四倍体鲫鲤群体在生物进 化和鱼类遗传育种方面都有重要意义。用雄性异源四倍体鲫鲤与雌性 二倍体红鲫交配形成了不育三倍体湘云鲫二号。异源四倍体鲫鲤、三 倍体湘云鲫二号的形成为不同倍性鱼的生物学比较提供了重要的生 物学平台，因此对三倍体湘云鲫二号和异源四倍体鲫鲤生殖和发育的 研究具有重要意义。 本研究采用同源克隆和c瑚蚣末端快速扩增技术(RACE)，从 三倍体湘云鲫二号与异源四倍体鲫鲤精巢中克隆得到v口s口基因的全 编码690个氨基酸；三倍体湘云鲫二号c饼蛆序列全长2721bp，编 码689个氨基酸。红鲫v伽a基因全长cDNA序列已有报道。三者均 毒’ 具有DEAD-box家族成员特有的8个保守基序和Ⅷs日基因的典型特 征。ImPCR结果表明，v口s口基因只在三倍体湘云鲫二号与异源四倍 体鲫鲤的精巢和卵巢中特异表达，在其他组织部位不表达。实时荧光 定量PCR(realtimePCR)结果表明：鲤鱼、红鲫、异源四倍体鲫鲤的 卵巢和精巢中嬲口基因的表达量在繁殖期低于非繁殖期；但在三倍 体湘云鲫二号卵巢中v伽口基因的表达量在繁殖期高于非繁殖期，在 精巢中v以s口基因的表达量繁殖期与非繁殖期无显著差异；在胚胎发 育的各个时期，三倍体湘云鲫二号和异源四倍体鲫鲤Ⅷs口基因表达 量均高于红鲫。原位杂交结果显示螂口基因在鲤鱼、红鲫、三倍体 湘云鲫二号和异源四倍体鲫鲤精巢和卵巢中均有表达，在卵巢中三倍 体湘云鲫二号的表达量与鲤鱼、红鲫和异源四倍体鲫鲤无显著差异； 在精巢中三倍体湘云鲫二号v傩口基因表达量明显低于鲤鱼、红鲫和 异源四倍体鲫鲤。 本研究具体阐述了哪以基因的表达与不同倍性鱼的可育(二倍 体改良红鲫和异源四倍体鲫鲤)和不育(三倍体体湘云鲫二号)的关 系。证实了v傩以基因在多倍体鲫鲤性腺发育过程中起着至关重要的 作用，为研究三倍体湘云鲫二号不育机制提供了实验依据并奠定了理 论基础。 关键词：异源四倍体，三倍体湘云鲫二号，realtimePCR，组织原位 杂交，v口s口 ABSTRACT The对蛆helicase V伽口isamemberoftheDEAD-box protein that rolesin cellformationin metaZoans． fI锄ily playskey germ high ‰口genesspecifically inthecellsof expressedonly r印roductiVesystem in usedasmolecular markersof manybiological，iswidely gemcells， an roleinthe ofanimal cellsand playedimportant stlJdy germ reproductiVeregulation． ’r