β-半乳糖苷酶生菌的筛选及酶法制备低聚半乳糖的研究.pdfVIP

13一半乳糖苷酶产生菌的筛选及酶法制备低聚半乳糖的研究 摘要 用以乳糖为唯一碳源和能源的筛选培养基，从土壤筛选出10株产较高 活力的p．半乳糖苷酶的真菌，其中编号为Q5的菌株酶活力最高，达 4．47U／mL。通过对菌落形态、菌体形态和18s rDNA的研究，结果发现Q5 最佳产酶培养基配方为：乳糖2％，豆饼粉3％，硝酸钠0．2％，K2HP04 0．05％，KCl 0．1％，FeS04 0．15％，MgS04 0．015％，pH5．0。最佳产酶条 该菌的酶活力达8．76U／mL，是优化前的1．96倍。 对Q5菌株的p．半乳糖苷酶酶学性质的研究结果表明：该酶的酶促反应 pb2+对该酶有强烈的抑制作用，而EDTA则使p．半乳糖苷酶活力提高了 62％。 以壳聚糖作为载体，戊二醛为交联剂，将该B．半乳糖苷酶共价固定。 结果表明，固定化酶活力回收率为85．17％；最适酶促反应温度为6012，比 游离酶提高5。C；最适反应pH值为4．0，比游离酶的降低了0．5个单位；对 热和pH的稳定性有所提高；该固定化酶在重复使用十次(12h／次)后仍 有60％酶活力。 对该p．半乳糖苷酶法制备低聚半乳糖进行了初步的研究，优化的反应 条件为：pH4、55。C、反应24h。该酶在优化条件下催化的乳糖水解率最高 达70％，低聚半乳糖的产率达31％；固定化酶和游离酶制备低聚半乳糖的 乳糖水解率和低聚半乳糖的产率相差不大。 关键词：低聚半乳糖 p．半乳糖苷酶 固定化酶筛选 酶学性质 II SCREENING PRODUCINGSTRAINS OF[；-GALACTOSIDASE ANDSTUDIESON OF SYNTHESIS USING p— GALACTOSlDASE ABSTRACT lactoseasthesolecarbonand sourceofthe Using energy medium，ten filamentous 1 screened lB-galactosidaseproducing fungistrains(Q1-Q0)were fromthesoil．Thestrainwiththe was Q5 highest13-galactosidaseactivity selectedforfurther on andthe of study．Studiescolony shape，charactersgene 1 in show 8srRNA blast GenBank thatstrainwasmost sequenceanalysis Q5 relatedtothestrainAlternaria．The