β1,4-半乳基转移霉I与EGF、HB-EGF、TGF-α在胚胎着床调控中的作用.pdfVIP

pl，4．半乳糖基转移酶I与EGF、HB．EGF、 TGF．0【在胚胎着床调控中的作用 硕士生姓名：高金艳 指导教师：孔 英 教授 专业名称：生物化学和分子生物学 摘 要 l，4．半乳糖基转移酶 目的：研究EGF、HB．EGF、TGF．a与D I参与胚 I(p1，4-GaITI)在胚胎着床调控中的相互影响，完善B1，4．GaIT 胎着床调控的机理。 方法：将已构建好的∥』，4．GaIT，基因过表达质粒、干扰质粒、干扰对 照质粒和空载体质粒分别转染RL95．2细胞(模拟着床期子宫内膜细胞)， 各组转染细胞的131，4．GaIT 细胞共培养，检测各组细胞Dl，4．GaITI的表达情况；通过体外着床模型 (以JAR细胞模拟着床前胚胎、以RL95．2细胞模拟着床期子宫内膜)观察调 控131，4一GaITI、EGF、TGF．a后对胚胎着床的影响。 后通过检测RL95·2细胞内绿色荧光蛋白的出现判断转染效果： 夕j，4．GaITI基因过表达组及基因干扰组与正常培养组、空载体转染组相 I基 比表达有明显差异，判断转染效果良好。(2)RL95．2细胞经∥J，彳．GaIT 因过表达质粒转染后，检测其∥J，4．GaIT 高于正常组(s5．3+0．5％)、空载体组(81．04-0．4％)和基因干扰对照组 ∥J，彳．GalTI基因和蛋白的表达增高，同时对应的JAR细胞黏附率分别为 EGFAb或TGF．aAb共培养24h后，Gall31，4GlcNAc合成量显著降低， 厣J，4一GaITI基因和蛋白的表达减少，对应的JAR细胞黏附率分别为 I与EGF、HB．EGF、 结论：模拟子宫内膜的RL95．2细胞，其Dl，4．GaIT TGF．a表达相互影响并进一步影响胚胎着床，推测子宫内膜细胞 I的表达影响胚胎与子宫内膜的识别和黏附可能通过调节 Bl，4．GaIT I的表达有关。 胚胎发育及着床机制可能与子宫内膜细胞pl，4．GaIT 关键词：EGFHB-EGFTGF．a I 着床调控 Bl，4-GAIT 2 of Regulation blastocystimplantation by ltransferaseI and EGF，HB—EGFTGF．伍 Master candidate：Gao degree Jinyan Supervisor：Professor KongYing andMolecular Major：Biochemistry Biology Abstract detecttheroles Objective：