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斑马鱼zTWEK和暗纹东方鲀gTRAIL的克隆表达、进化分析、生物学功能研究.pdf
摘要
摘要
表达、组织分布以及生物信息学分析。TWEAK是肿瘤坏死因子配体超家族成员,是
一个多功能的细胞因子。为研究不同物种之间此基因进化关系,本文运用反转录PCR
30.8%,进化树分析还表明斑马鱼与河鲍鱼的同源性是48.0%,而与绿河鲍的同源性是
式动物提供了有用的信息。
第二部分暗纹东方鲍TRAIL基因的克隆、表达、组织分布及生物学功能的研究。用
的全长cDNA,其开放阅读框包含870碱基对,编码的蛋白质序列与其他的鱼类具有
的凋亡。
关键词:斑马鱼;暗纹东方纯;肿瘤坏死因子弱诱导凋亡因子;肿瘤坏死因子相关凋
亡诱导配体;克隆:进化分析;凋亡
Abs仃act
Abstract
ofthe amultifunctional
member
TWEAK,a TNF—ligandsuperfamily,is cytokine.To
TWEAK theeDNAof
the of cloned
investigateevolutionaryrelationship gene,we
TWEAKfrom as PCR
zebrafish(designatedzTWEAK)by
frame of711bases a of236
(RT—PCR).TheopenreadingfORF)consistsencodingprotein
amino ofzTWEAKwithhumanandmouseare31.4%and
acids.Comparisonssequence
exhibitsthe 48.0and59.5谢也the
30.8%.Phylogeneticanalysis highestidentity fugu
the to
(Fugu tetraodon(Tetraodon identity
rubripes)and
mammalianTWEAKsfrom29.6%to32%.RecombinantsolubleTWEAK
ranges
fusedwithSUMOtoenhancethe inE.coil
(zsTWEAK)was expression
fused withamolecularof33kDa,was
resultingprotein,whichhigrdyexpressed weight
metalchellate confirmed
purifiedusing affinity by
SDS—PAGEandWestern constructedand afused
blotting.Thisstudy expressedprotein
wh
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