水稻抗逆转录因OsAP22基因转化小麦的研究.pdfVIP

第二章农杆菌介导法的OsAP22基因小麦转化………………………………．．16 1实验材料……………………………………………………。…………………………………16 1．1植物材料…………………………………………………………………………………．16 6 1．2质粒载体………………………………………………………………………………一l 1．3菌株…………………………………………………………………………………………………………………17 1．4培养基…………………………………………………………………………………．17 2实验方法………………………………………………………………………j……………18 2。l载体质粒DNA的提取…………………………………………………………………18 2．2农杆菌感受态细胞的制备………………………………………………………………19 2．3载体质粒转化农杆菌…………………………………………………………………．．19 2．4农杆菌介导法转化小麦幼胚…………………………………………………………．19 2．5转基因植株的检测………………………………………………………………………20 3结果与分析…………………………………………………………………………………．23 3．1再生植株的获得………………………………………………………………………．．23 3．2阳性植株的获得………………………………………………………………………．．24 4讨论………………………………………………………………………………………………………………………26 第三章转基因T2代植株纯系的获得…………………………………………………27 I实验材料……………………………………………………………………………………27 2实验方法……………………………………………………………………………………27 2．1T2代转基因植株DNA的提取………………………………………………………．．27 2．2 T2代转基因植株PCR检测……………………………………………………………28 3结果与分析……………………………………………………………………………………29 4讨论………………………………………………………………………………………………………………………31 第四章转基因T1代和T2代的抗逆性………………………………………………34 1材料和方法…………………………………………………………………………………．34 1．1脯氨酸(Pr0)含量的测定(茚三酮法)……………………………………………………35 比～……陟恻郴嘲……………』Ⅲ㈣乳5 2结果与分析…………………………………………………………………………………．．36 2．1盐胁迫下Pro含量和SOD活性………………………………………………………36 2．2干旱胁迫下Pro含量和SOD活性……………………………………………………39 3讨论………………………………………………………………………………………………………………………4l 参考文献……………………………………………………………………………………43 致谢……………………………………………………………………………………………43 扬州大学学位论文原创性声明和版权使用授权书………………………………49 张嫒：水稻抗逆转录冈子OsAP22基l六J转化小麦的研究 水稻抗逆转录因子OsAP22基因转化小麦的研究 研究生：张媛 导师：陈建民教授 (扬州大学，江苏扬州，225009) 摘要 小麦是世界上最重要的粮食作物之一。我国小麦种植面积仅次于水稻，约占粮食作物 种植面积的27％。目前，干旱、盐渍等非生物逆境遍及世界各地，已成为威胁植物生长和 生态环境的主要因素。提高小麦抗逆性、创造抗逆新品种，对粮食安全和社会稳定具有重 要意义。 株，经PCR检测，共有阳性转基因植株5株，转化率为0．32％。 采用传统自交方法获得转