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灵发素诱导半夏体细胞胚胎裳生书哩的研究 灵发素诱导半夏体细胞胚胎发生机理的研究 摘要 体细胞胚胎诱导发生是培养植物离体再生植株的重要途径之一，因此研究植物体 胚诱导、发育和细胞分化的机理等具有重要的理论和实际意义。灵发素(LFS)是一 种新型的植物生长调节剂，它既具有细胞分裂素(CTK)的化学结构和生物活性，同 时又有生长素的生物活性。不同的植物体胚发生对植物生长调节剂的要求不同，本文 从形态学效应、组织解剖、及相关生理生化指标等方面研究LFS与其它常用植物生 探讨LFS诱导药用植物半夏体细胞胚胎形态建成的机制。所获主要结果如下： 植体最佳，叶片次之，块茎几乎不能诱导体胚的发生。 处理与BA单独处理及2，4一D单独处理诱导效果差异不显著；但各处理组诱导效果均 优于对照(MS)。 单独处理诱导效果最好，显著优于其它处理，且再生植株整齐健壮：以NAA单独处 理萌发效果最差。 10d再进行常规光照培养的效果最佳，诱导率高，诱导出的体胚健壮，且易于萌发， 再生植株整齐健壮。 胚多发生于愈伤组织表层或近表层。LFS单独处理与对照(MS)在诱导体胚发生的 广西大掌硕士掌位论文 灵发素诱导半夏体细崩明丕胎发生和L|重的研究 时间上无明显差异，且在同一愈伤组织块中同时存在不同发育时期的体细胞胚胎。半 夏体细胞胚胎发生经历与合子胚类似，它们的结构和关键阶段经历均表现为多细胞原 胚、球形胚、鱼雷形胚、盾形胚和成熟胚，最后萌发成完整植株。 单独处理组的可溶性蛋白质含量最高，显著高于其它处理组，即促进了可溶性蛋白质 的积累；在可溶性糖积累高峰期，各处理组可溶性糖含量差异不显著，但显著高于对 照(MS)；在淀粉积累高峰期，各处理组淀粉含量差异不显著，且与对照(MS)无 显著差异。 LFS(0．3mg／L)+NA SOD、 A(0．1mg／L)诱导半夏体细胞胚胎。从抗氧化酶活性上看， POD和PPO三种抗氧化酶相互配合来调节胚性细胞的分化和发育。酶活性变化与胚 性愈伤组织的诱导及胚的发育有着密切关系，表现在体胚的诱导和发育中起到主导作 独处理组活性最高，显著高于其它处理组，说明LFS单独处理组提高了SOD、POD 和PPO三种酶活性。 各处理IAA含量差异不显著，但均显著高于对照；ZR含量峰值出现于胚性愈伤组织 量最高，各处理GA3含量均显著高于对照；ABA含量于胚性愈伤组织时期出现一个 著高于对照；成熟胚时期再次出现峰值，LFS单独处理以及LFS+NAA处理组含量最 高，NAA单独处理对ABA含量的影响与对照差异不显著。 9、综上所述，LFS主要通过以下机制来促进了半夏体胚的诱导，提高了体胚的 萌发，体胚胚性愈伤组织时期高水平的可溶性蛋白质含量，为体胚发生提供物质和能 低水平的H202，从而提高体胚的抗性。L认含量早期胚时期最高，利于体胚的启动 灵发素诱导半夏体细胞舶明台发生审U里的研究 及早期发育；ZR含量和ABA含量于胚性愈伤组织时期较高，利于胚性细胞的分裂 和增殖以及体胚的启动；ABA含量于成熟胚时期再次达一峰值，利于体胚的萌发， 提高其萌发率。 关键词：灵发素；体细胞胚胎；半夏 广西大掌硕士掌位论文 夏冀：素诱导半夏体细胞胚胎发生机理的研究 StudiesontheMechanismofLFS Somatic inducing ofPinelliaternataBriet embryogenesis LiangQiongyue (CollegeofAgriculture，GuangxiUniversity,Nanning530004，China) Abstract Ithas theoreticaland inthe of important appl