由肿瘤特异性启动子mTERT+promotor驱动m4-1BBL基因治疗小鼠肝细胞肝癌实验及研究.pdf

由肿瘤特异性启动子mTERTpromotor驱动的m4-1BBL基因治疗小鼠肝细胞肝癌的实验研究中文摘要 由肿瘤特异性启动子mTERT promotor驱动的 m4．1BBL基因治疗小鼠肝细胞肝癌的实验研究 中文摘要 目的：构建由mTERT启动子驱动m4．1BBL基因的重组腺病毒载体，对比由非特异 性启动子一CMV启动子驱动m4．1BBL基因的腺病毒载体，从体内外实验探讨其治疗 小鼠肝细胞肝癌的效果。 动子基因和m4．1BBL基因，测序证实；按试剂盒操作分步将克隆成功的两个基因亚 Vector载体系统上，构建重组腺病毒载体质粒 Gateway 克隆到pAD／PL．DEST I将三种质粒线性化后用脂质体转染293A包装细胞，包装和 体病毒质粒pAD，Pac 化学方法证实病毒扩增成功。分别用上述三种病毒转染小鼠肝癌细胞株Hepal．6和小 鼠成纤维细胞株L929，用m4．1BBL的流式直标单克隆抗体检测添加不同滴度的病毒 和L929细胞中，MTT检测单纯添加病毒对两种细胞