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中文摘要
目的
从中医学对老年记忆的生理病理认识探讨老年人轻度认知障碍的发
病机理为脾肾亏虚,脑失所养。遵循中医“虚则补之”“未病先防,既病
防变"的治疗原则,提出固本健脑法治疗MCl。用东莨菪碱、NaNO:、40%
乙醇腹腔注射制备学习记忆获得障碍、巩固障碍、再现障碍小鼠模型,观
察固本健脑法对学习记忆获得障碍、巩固障碍、再现障碍模型小鼠学习记
忆能力的影响,探讨固本健脑法对学习记忆获得、巩固、再现各反面障碍
的治疗效果;用D-gal与NaNO:腹腔注射制备MCI大鼠模型,通过观察固
本健脑法对MCl模型大鼠学习记忆能力、海马组织病理形态、Cav-I、Syn、
作用机理,为中医药治疗中老年人轻度认知障碍提供理论和实验依据。
方法
I.将3月龄昆明种小鼠90只,随机分成3组,每组又分为3个亚组,
o只;固本健脑液组(B
即正常组(A组)30只,其中A1、A2、A3每组各1
组)30只,其中B1、B2、B3每组各1o只;模型组(c组)30只,其中c1、
C2、C3各1 0ml/kg·dq
o只。适应性喂养一周后,各组小鼠均每日1次按1
的剂量灌胃,正常组和模型组小鼠灌服o.9%的生理盐水,固本健脑液组
制备记忆获得障碍模型,B2、c2组腹腔注射亚硝酸钠制备记忆巩固障碍
组腹腔注射等容量生理盐水,用跳台法实验观察实验小鼠的学习记忆能
为。
s水迷宫法筛选出记忆能力相当的84只3月龄sD大鼠
2.将用Morri
随机分为6组,即正常组、模型组、脑复康治疗组(简称脑康组)、固本
健脑液低剂量组(简称固低组)、固本健脑液中剂量组(简称固中组)、固
本健脑液高剂量组(简称固高组),每组14只。各组大鼠适应性喂养一周
后,每日上午正常组大鼠腹腔注射生理盐水,固高组、固中组、固低组、
脑康组、模型组大鼠腹腔注射D-gai和NaNOz,连续40天以复制MCI模型,
从造模13天起每日下午加以正常组、模型组大鼠灌服生理盐水,固高组、
固中组、固低组、脑康组大鼠分别灌服相应药物进行预防,连续28天。
40天后用水迷宫行为学试验观察各组大鼠学习记忆能力,光镜、电镜下
观察各组大鼠海马组织病理形态学改变,免疫组化法检测各组大鼠海马组
SNAP-25的表达,免疫印迹法检测各组大鼠血清Cav-I、Syn的表达。
结果
1.与学习记忆获得障碍、巩固障碍、再现障碍模型各组小鼠相比较,
正常组潜伏期明显高于各模型组(尸<0.01)、5分钟内错误次数明显低于
各模型组(尸<0.01);固本健脑液治疗组潜伏期高于各模型组(尸<O.05)、
5分钟内错误次数低于各模型组(尸<o.05)。
2.与正常组相比,固高组、固中组、固低组、脑康组、模型组大鼠
精神倦怠,均不同程度的表现出饮水量、进食量、活动量减少,皮毛干枯、
稀疏、脱落。
3.Morri
s水迷宫行为学实验,定位航行实验中各组大鼠的平均潜伏
期、平台所在象限百分比,空间探索实验中各组大鼠的平均潜伏期、跨越
原平台位置的次数、平台所在象限百分比的结果,正常组、固高组、固中
组与模型组比较均有显著性差异(尸<0.01),固低组、脑康组与模型组比
较均有差异(尸<o.05),固高组、固中组与脑康组比较均有差异(尸<0.05),
固低组与脑康组比较没有统计学意义(尸>0.05)。
4.光镜、电镜病理形态上观察,正常组主要表现为海马神经元细胞
饱满,细胞层数及细胞数目较多,大小一致,排列紧密、整齐,胞膜完整,
突触结构丰富;模型组大鼠海马神经细胞数目明显减少,细胞排列混乱,
层数减少甚至单层,胞膜、核膜界限不清,胞核空泡变性,核仁变小、裂
解,胞质增多,突触数目明显减少;各治疗组介于正常组和模型组之间,
与模型组相比均有不同程度的改善,以固高组、固中组的改善最为显著。
5.免疫组化检测各组大鼠海马组织Cav-1蛋白的表达,结果正常组
大鼠海马内Cav一1蛋白阳性免疫产物表现最多,模型组最少,各治疗组介
于正常和模型组之间,与模型组相比均有不同程度的改善,以固高组、固
中组的改善最为显著。
表达,结果二者在各组大鼠海马内的表达具有高度的正相关性。正常组大
比较均有显著性差异(尸<o.
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