谷氨酰胺转氨酶在谷物食品中应用.docVIP

谷氨酰胺转胺酶在谷物制品加工中的应用 摘要:介绍了微生物谷氨酰胺转胺酶的理化性质和作用机理。详细描述了谷氨酰胺转胺酶在谷物制品中的应用，重点叙述了其在面制品中的用途，并展望了其在食品中的广阔的应用前景。 关键词:谷氨酰胺转胺酶; 谷物; 应用 谷氨酰胺转胺酶（Transglutaminase）γ-谷氨酰胺基转移酶（EC，Tgase是一种催化酰基转移反应的转移酶，能催化蛋白质分子内或分子间的交联、蛋白质和氨基酸之间的连接以及蛋白质分子内谷氨酰胺基的水解，从而改善蛋白质的结构和功能特性并能通过引入赖氨酸而提高蛋白质的营养价值。可以改善食品结构、溶解性、起泡性、乳化性、流变性等。其在生物医药、纺织、化妆品等诸多领域有着广泛的应用前景。1957年Clarke等人第一次提出TGase一词，用来描述豚鼠肝脏的促使酞基转移酶的活性，此后在微生物、植物、无脊椎动物、两栖动物、鱼类、鸟类中都发现了TGase。 1 谷胺酰胺转胺酶的种类 不同来源的谷胺酰胺转胺酶其性质也有所不同。根据来源主要分为两大类，其性质也有所差异。 1.1 来自微生物的谷氨酰胺转胺酶 来自微生物的谷氨酰胺转胺酶其摩尔分子量为23～40（×10）331 个氨基酸构成，活性中心包括带有自由硫巯基的Cys 残基分泌型蛋白质，亲水性，但有疏水性部分分散在序列中，被安置在酶表面的亲水区，其对酶活性的影响尚未发现。活性不依赖于Ca序列。最适pH 6.0～7.050℃。PCMB，NEM，MIA，pb，Zn，Cu EDTA 无影响，其它金属对酶活性无明显影响。等电点8.9，较为稳定，经过离心和过滤后的滤液在－20℃10%，重复溶解和冷却，并不明显增加酶活性的损失，经过纯化后的酶更为稳定。 1.2 来自动物肝脏组织的谷氨酰胺转胺酶 来自动物肝脏组织的谷氨酰胺转胺酶：其分子量为70～90（×10）Ⅰ、Ⅱ两型，单聚链，468～479 Cys 残基，Ⅰ型和Ⅱ型功能区非常相似，但其余部分并不全部相同。等电点4.5 ，其热稳定性、pH 值、温度、对底物的要求等均不同于微生物谷氨酰胺转胺酶，且不同肝脏或组织的谷氨酰胺转胺酶其性质也并不完全相同，但其活性中心均依赖Ca。此外，植物组织中也发现此酶，对其研究目前还较少。 2 TGase 性质和作用机理 微生物发酵生产所得的TGase 最适pH 值在5和8 之间，最佳酶催化温度是55 ℃，酶在70 ℃会失活，而接近冰点时，仍可保留一点活性。TGase 并不完全依赖于钙离子，但是Cu、Zn、Pb、Li对酶活有强烈的抑制作用。因为这些重金属离子会结合巯基，而这些巯基恰处于酶的活性位点。 TGase 催化机理为利用肽链上的谷氨酰胺残基上的甲酰胺基为乙酰基供体，受体可以是蛋白质上的或游离氨基酸上的胺基、伯胺基、水。TGase 既可以催化蛋白分子间的交联，又可以催化分子内的交联反应。TGase 催化的主要反应如下: 注: a—酰基转移反应; b—蛋白质Gln 残基和Lys 残基之间的交联反应; c—脱氨基化反应。 TGase可催化如下反应: ①它可催化蛋白质以及肽键中谷氨酰胺残基的γ-羧酰胺基和伯胺之间的酰胺基转移反应，利用该反应可以将赖氨酸引入蛋白质以改善蛋白质的营养特性；②当蛋白质中的赖氨酸残基的ε-氨基作为酰基受体时，蛋白质在分子内或分子间形成ε-( γ -glutamyl) lys 共价键，通过该反应，蛋白质分子间发生交联，使得食品以及其它制品产生质构变化，从而赋予产品特有的质构特性和粘合性能；③当不存在伯胺时，水可成为酰基的受体，使得谷氨酰胺残基脱氨。上述转胺反应可改变蛋白质的等电点、溶解度等功能性质。 3 TGase 在谷物食品中的应用 3.1 TGase 在小麦制品中的应用 小麦是我国三大主要粮食作物之一，全国年总产量在1亿吨以上。随着我国人民生活水平日益提高，人们对食品提出了更高的要求。人们通常在面粉或面制品中添加改良剂，能很好地提高面制品质量。但这些改良剂多以化学品为主，如强筋剂溴酸钾，增白剂过氧化苯甲酰。而化学改良剂往往对人体健康造成不利影响，像溴酸钾以及过氧化苯酰已被禁止使用。目前，国际上研究的热点是应用生物技术，采用新型酶制剂来替代化学改良剂。酶制剂作为天然食品添加剂，容易被人们接受。因此，找到一种较好的酶制剂延长面粉的保质期，改善面粉的加工性能，提高面粉的营养价值是当前研究热点。TGase 作为食品添加剂，在国外已经进行大量研究，并逐渐应用于生产面粉制品中。利用其共价交联的催化特性在面粉制品的加工中具有重大的意义。 3.1.1 TGase 在改善小麦粉的品质中应用 3.1.1.1 改良虫蚀小麦粉 在中东、东欧和北非的许多国家里，由昆虫在收割前造成的小麦虫蚀现象时有发生。这些害虫侵蚀麦粒，大量的谷物中含有较多的蛋白酶，破坏了面团的面