HTK液改良液氮深低温保存法对大鼠带瓣管道活性的影响.pdf

万方数据 目 录 1.中英文对照1 2.中文摘要2 3.英文摘要3 4.前言5 5.材料与方法7 6.结果16 7.讨论29 8.结论38 9.参考文献39 10.致谢42 11.综述43 万方数据 中英文对照 英文缩写 英文全称 中文名称 GMR glucose metabolic rate 葡萄糖代谢率 HTK Histidine-tryptophane-Ketoglutarat 组氨酸-色氨酸-酮戊二酸 VHC valved homograft conduit 同种异体带瓣管道 AKA alpha-ketoglutaric acid α-酮戊二酸 ATP adenosine triphosphate 三磷酸腺苷 NAD nicotinamide adenine dinucleotide 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 NADP nicotinamide adenine dinucleotide phosphate 尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 DMSO Dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜 FCS Fetal calf serum 胎牛血清 万方数据 中文摘要 HTK 液改良液氮深低温保存法对大鼠带瓣管道活性的影响 目的：观察HTK 液对液氮深低温保存法进行改良后大鼠带瓣管道活性的的变化并 探讨其作用机制。 方法：将SD 大鼠随机分成 7 组，取下主动脉带瓣管道，(1) 对照组（control group）：带瓣管道不经灭菌孵育直接进行各项指标的检测。(2) 实验组A：带瓣 管道置于含有RPMI1640 培养基和抗生素的无菌标本瓶中4℃灭菌孵育24 小时。 (3) 实验组B：带瓣管道置于含有半量RPMI1640 培养基，半量HTK 液及抗生素 的无菌标本瓶中 4℃灭菌孵育 24 小时。(4) 实验组 C：带瓣管道置于含有 HTK 液和抗生素的无菌标本瓶中4℃灭菌孵育24 小时。(5) 实验组D：采用实验组C 的方法灭菌24 小时后，将带瓣管道置于含有70% RPMI1640 培养基+20% 胎牛血 清+10% DMSO 的冻存液中深低温冻存6 个月。(6) 实验组E：采用实验组C 的方 法灭菌24 小时后，将带瓣管道置于含有35% RPMI1640 培养基+35% HTK 液+20% 胎 牛血清+10% DMSO 的冻存液中深低温冻存6 个月。(7) 实验组F：采用实验组C 的方法灭菌24 小时后，将带瓣管道置于含有70% HTK 液+20% 胎牛血清+10% DMSO 的冻存液中深低温冻存6 个月。对各实验组的带瓣管道进行细菌学、细胞活性、 组织学检测，并对实验组C、D、E、F 实验前后α-酮戊二酸含量进行检测。 结果：各实验组带瓣管道均未检出细菌及真菌。在灭菌孵育期间中，除对照组 之外，实验组C 带瓣管道的细胞活性保存最好，细胞外基质结构保存最完整，灭 菌孵育期间α-酮戊二酸含量随时间的延长进行性下降。在深低温冻存期间，各 实验组的带瓣管道保存效果无明显差别。 结论：采用HTK 液对液氮深低温保存法进行改良，能提高大鼠带瓣管道在灭菌孵 育期间细胞活性及细胞外基质结构的保存效果。其主要机制是在灭菌孵育期间， HTK 液中的组氨酸