甘蓝型油菜和甘蓝杂种后代的细胞学分析.pdfVIP

两南大学硕十学伊论文 摘要 甘蓝型油菜与甘蓝杂种后代的细胞学分析 作物遗传育种专业硕士研究生李勤菲 指导老师钱伟教授李加纳教授 捅 要 甘蓝型油菜是由白菜型油菜和甘蓝杂交，染色体自然加倍进化而来的异源四倍体。在长期进 化和驯化中，甘蓝型油菜基因组与其亲本种存在很大差异。开展甘蓝型油菜与甘蓝远缘杂交，能 达到相互间转移一些特殊性状，拓宽遗传基础的目的。本文通过甘蓝型油菜与甘蓝杂种后代的细 胞学分析，期望为甘蓝型油菜和甘蓝间相互转移性状提供理论依据。研究结果如下： 1、甘蓝型油菜与甘蓝杂交亲和性分析 本研究以甘蓝型油菜X甘蓝为正交，进行正反交测验。以甘蓝型油菜为母本授以lO份野生甘 蓝的花粉，其中5份未产生种子；授以4份栽培型甘蓝的花粉，均产生了种子。甘蓝型油菜 与甘蓝杂交共授粉花蕾2026个，结籽442粒，其结实率为21．82％；甘蓝型油菜与野生甘蓝 杂交共授粉花蕾917个，结籽194粒，结实率为21．26％；甘蓝型油菜与栽培甘蓝杂交共授粉 花蕾1109个，结籽248粒，结实率为22．36％。甘蓝型油菜与甘蓝杂交亲和性差，属于受精 后障碍；野生甘蓝和栽培甘蓝同甘蓝型油菜杂交的亲和性无显著差异。 2、甘蓝型油菜与甘蓝杂种F1代的获得 本研究利用两份甘蓝型油菜与三份不同种类的甘蓝进行杂交，通过胚挽救获得杂种，杂种经 过形态学鉴定，花粉育性鉴定，细胞学鉴定以及SSR标记鉴定，根据结果，确定三个甘蓝型 油菜与甘蓝的真杂种可用于细胞学研究。即杂种197(羽衣甘蓝×GH-6)，199(中双9号× 芥蓝)和杂种201(中双9号×K10263)。 3、甘蓝型油菜与甘蓝杂种Fl代的细胞学分析 (1)本文对三个杂种的终变期PMCs的染色体配对行为进行了观察，结果显示， II+10 I+9．12 现频率最高的是9 I(60．17％)，染色体配对的规律是：9．06II+O．10III+0．081V +0．01 II+10 率最高的是9 I(84．71％)，染色体配对规律是9．66 是：10Ⅱ+8I(33．51％)和9II+10I(27．32％)，配对规律是：7．48I+9．81Ⅱ+O．13III+ O．07Ⅳ。197和199表现高频率的9II+10I配对行为，而201不仅表现高频率的9II+10I配 对行为，还表现较高频率的lOII+8 I配对行为。 (2)本文观察了三个杂种的减数分裂后期I的染色体分离规律，结果显示， 两南大学硕+学伊论文 摘要 色体分离规律，并且根据适合度的研究，当染色体数目是9或者19的时候，适合度最高， 说明甘蓝型油菜与甘蓝杂种后代出现整倍体配子的频率高。 (3)本研究发现甘蓝型油菜与甘蓝的杂种染色体分离时出现偏分离的现象，染色体分离时出现 染色体桥以及染色体落后的现象。 4、甘蓝型油菜与甘蓝杂种的小孢子培养及其后代的细胞学分析 本研究对三个真杂种进行小孢子培养，仅杂种199获得了115个胚，最终获得44棵成熟的植 株。对成苗的42个材料的染色体数目进行了观察，发现有9个材料表现混倍体，其余33个 材料的染色体数目从15到66，形成了变异大的群体。在小孢子后代中仍然发现19条染色体 的植株，整倍体配子的频率达7．14％，比理论值高。结果表明在甘蓝型油菜与甘蓝杂种后代 中产生较高频率的整倍体配子，并且远缘杂种后代配子的生长发育是十分复杂的。 总之，本研究表明甘蓝型油菜与甘蓝杂交F1代终变期花粉母细胞以9II+10I和10II+8I为 主的染色体配对行为，减数分裂后期I相对理论值而言，出现高频率的整倍体，小孢子后代的染 色体变异广泛。 关键词：甘蓝型油菜甘蓝细胞学小孢子培养 II 两南大学硕十学伊论文