不同倍性鱼骨骼肌肌纤维的比较的研究.pdf

{111113 1 IIIIIII Illl l l IIf Y1913055 摘 要 以改良二倍体红鲫(早)为母本，改良四倍体鲫鲤(艿)为父本， 通过倍间杂交获得了具有显著改良性状的三倍体鲫鱼一湘云鲫2号。 湘云鲫2号不仅具有生长速度快、不育等特点，而且还具有含肉率高、 脂肪含量低、氨基酸种类丰富等优点。本研究首次通过石蜡切片和电 镜切片对改良二倍体红鲫、湘云鲫2号和改良四倍体鲫鲤骨骼肌肌纤 维的显微和亚显微结构进行了比较研究，并对这三种鱼的肌肉生长抑 制素基因(MSTN)进行克隆测序，研究它在不同倍性鱼肌肉组织中的 表达差异。本论文获得的主要研究结果如下： 1、采用石蜡切片技术对改良二倍体红鲫、湘云鲫2号以及改良四 倍体鲫鲤骨骼肌肌纤维的显微结构进行了比较分析。结果表明：3种 不同倍性鱼的骨骼肌肌纤维横切面均呈多角形。对同一倍性鱼不同年 龄段的骨骼肌肌纤维横切面直径进行比较，发现同一倍性鱼骨骼肌肌 纤维横切面直径均随年龄的增加而增大。对同龄的不同倍性鱼骨骼肌 肌纤维密度和横切面直径进行比较，发现湘云鲫2号的肌纤维密度小 于改良二倍体红鲫和改良四倍体鲫鲤，改良二倍体红鲫和改良四倍体 鲫鲤之间无明显差异，且湘云鲫2号骨骼肌肌纤维横切面直径显著大 于改良二倍体红鲫和改良四倍体鲫鲤，改良二倍体红鲫和改良四倍体 鲫鲤之间无明显差异，这为湘云鲫2号生长速度快、个体大提供了肌 肉方面的细胞生物学依据。此外，不同倍性鱼的骨骼肌肌纤维平均核 体积的大小随倍性的增高而增大。 2、为了对湘云鲫2号骨骼肌肌纤维横切面直径显著大于同龄的 改良四倍体鲫鲤、改良二倍体红鲫的现象进行更深入的研究，我们采 用透射电子显微镜对同龄的改良二倍体红鲫、湘云鲫2号以及改良四 倍体鲫鲤骨骼肌肌纤维横切面的亚显微结构进行了比较研究。结果发 现：3种不同倍性鱼的骨骼肌肌纤维横切面均由两种不同形态的肌原 纤维组成，即位于外层的呈带状的肌原纤维和位于中心的呈多角形的 肌原纤维。位于肌纤维中心的呈多角形的肌原纤维直径在三种不同倍 性鱼中无明显差异，而位于肌纤维外层的呈带状的肌原纤维横切面长 径在这三种鱼中存在着显著差异，表现为湘云鲫2号显著大于改良二 倍体红鲫和改良四倍体鲫鲤，而改良二倍体红鲫和改良四倍体鲫鲤之 间无明显差异。这与不同倍性鱼骨骼肌肌纤维横切面直径的石蜡切片 比较结果一致。 3、肌肉生长抑制素基因(MSTN)是一个重要的影响骨骼肌生长发 育的负调控因子，具有抑制肌肉生长的作用。对三种不同倍性鱼MSTN 基因在这三种不同倍性鱼之间的同源性高达97％，具有高度的保守性。 对MSTN基因在不同倍性鱼中的表达进行半定量PCR研究，发现MSTN 基因的转录水平在湘云鲫2号中最低。湘云鲫2号含肉率高、脂肪含 量低的特点可能与MSTN基因在湘云鲫2号表达量低有关。 总之，上述研究结果表明湘云鲫2号的肌原纤维与其父母本的肌 原纤维存在明显的差异性，为证明湘云鲫2号的肉质特殊性提供了重 要的生物学依据。该研究结果在鱼类遗传育种和生物进化研究方面具 有重要意义。 关键词：改良二倍体红鲫，湘云鲫2号，改良四倍体鲫鲤，骨骼肌肌 纤维，肌原纤维，肌肉生长抑制素基因 Il ABSTRACT Thesterile crucian improvedtriploid carp(ITCC)was producedby themalesof xATwiththe Gl femalesof red mating diploid improved crucian