茶树氮素转运蛋白相关基因的克隆和功能分析.pdf

摘要 氮素是植物生长发育过程中不可缺少的重要元素，是植物体中多种重要成份的组 成元素。硝酸盐和铵盐是植物可直接吸收利用的主要氮源，是通过植物氮素营养吸收 转运生物大分子硝酸盐转运蛋白和铵盐转运蛋白完成的。茶树是多年生的叶用植物， 每年茶叶的采摘会周期性的带走部分的氮素，为满足茶树来年的正常生长，人们便大 量的向茶园施加氮肥，但是这也带来更多的负面效果例如经济的浪费、生产成本的增 加及环境的污染。利用分子生物学技术能够快速的选育氮高效吸收的茶树品种，对于 茶树育种工作具有很重要的意义。 本文以‘龙井长叶’、 ‘舒茶早’、 ‘凫早2号’三个茶树品种为研究材料，在 cDNA的全长序列，并对其进行了初步的生物信息学预测和分析。通过荧光定量PCR 组织，不同品种间的表达差异分析，进一步研究不同氮素浓度处理下各基因的表达模 式和表达特性。主要研究成果如下； 号为KJl60503。 2．序列分析表明该基因属于疏水蛋白，含有12个跨膜区域，其中第6个和第7个被 一个大的亲水环连接，多序列比对发现CsNRT含有6个保守的蛋白激酶C的结 合位点，前后各有两个MFS家族的结构域属于MFS家族。 水平进行研究发现，这二个基因在茶树的根茎叶中都有表达，都是在根中的表达 水平最高。 4．以‘龙井长叶’、‘舒茶早’、‘凫早2号’一年生无性系茶苗为实验材料，分别用 低浓度(0．5mmol·LJ)、中浓度(1mmol·L‘1)、高浓度(2mmol·L。1)的N03处理。 的时候响应较强烈，而‘凫早2u．’对中高浓度响应较强烈，‘舒茶早’NRT的 变化量不是很明显。 5．分别用fL乇(0．5mmol·L。1)、中(1mmol·L。)、高浓度(2mmol·L。1)的的NH4+溶液必 万方数据 的表达水平结果表明，AMTl．1在根部的表达不随浓度和时间的变化而变化，而 该基因在茶树的茎、叶中会发生变化。在不同浓度的NH4+溶液处理下随时间的 增加两个基因表达水平都表现出先升高后下降的趋势。 关键词：茶树，硝酸盐转运蛋白，铵盐转运蛋白，基因克隆，表达分析 万方数据 AB STRACT isan and elementin and development， importantindispensableplantgrowth Nitrogen of elementsin and it'sthe element compositionmanyimportantcomponent plants．Nitrate anduse arethemain sourcescouldabsorb ammonium nitrogen plants directly,byplant ammoniumnitrateand nutrition macromolecules nitrogen absorbingbiological oftransport ammonium is forleaf couldbe