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丹参对皮瓣缺血再灌注损伤保护作用的实验的研究.pdf 50页

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目 录 中文摘要………………………………………………………………l 英文摘要………………………………………………………………4 研究论文丹参对皮瓣缺血再灌注损伤保护作用的实验研究 前言………………………………………………………………99刖吾……………………………………………………………… 材料与方法………………………………………………………9 结果………………………………………………………………16 附图、附表………………………………………………………19 讨论………………………………………………………………30 结论………………………………………………………………34 参考文献…………………………………………………………34 综述丹参对皮瓣缺血再灌注损伤影响机制的研究进展…………37 致谢……………………………………………………………………47 个人简历………………………………………………………………48 中文摘要 丹参对皮瓣缺血再灌注损伤保护作用的实验研究 摘 要 目的:通过观察丹参注射液对大鼠缺血再灌注皮瓣成活面积和组织学 变化的影响,以期证实丹参在皮瓣移植术后,防治皮瓣坏死,提高皮瓣移 细胞间粘附分子1(ICAM.1)的含量,初步探讨其作用机制,为临床应 用提供客观的实验依据。 方法: 河北医科大学实验动物中心)。 2动物分组:将大鼠随机分为3组,每组l6只。①非缺血再灌注组(非 .IR组):皮瓣形成后原位缝合,不做其他处理。②缺血再灌注组(IR组): 术前3天至术后5天,每日腹腔注射生理盐水2ml/kg,皮瓣形成后,用微 血管夹夹闭腹壁浅动脉发出点近侧端的股动脉,皮瓣原位缝合,8h后去 除动脉夹,恢复血供。③丹参一缺血再灌注组(丹参一IR组):将生理盐水换 为丹参注射液2ml/kg,其余操作同IR组。 3皮瓣制备:动物于术前三天用硫化钠脱毛,术时3%戊巴比妥钠 JJ等【6】描述的方法,于右下腹形成 (40mg/kg)腹腔注射麻醉,依据Petty 一以腹壁浅血管为蒂的轴形皮瓣,大小约为3cmx6cm,深至皮下肉膜层, 充分游离腹壁浅动脉发出点部位的股动脉段,微血管夹夹闭其发出点近侧 的股动脉,皮瓣原位缝合。 4取材:IR组和丹参.IR组的8只大鼠于掀起皮瓣后即刻、再灌注后2h、 织部分用4%多聚甲醛即时固定待做石蜡切片及免疫组化染色,部分冰冻 保存至生化检测。于术后7天观察3组中其余8只大鼠皮瓣成活情况,并 计算皮瓣成活率。 5检测方法及观察指标: 5.1皮瓣大体观察:术后第7d对大鼠皮瓣成活的情况进行肉眼观察。 中文摘要 5.2皮瓣成活率:坏死皮瓣通过观察其外观、颜色及质地等来判断。术后 Plus.v6.0图象 7d,数码相机进行皮瓣摄像后输入计算机,通过Image.Pro 分析系统,计算皮瓣成活率(皮瓣成活面积与总面积之比)。 5.3组织学检查:将石蜡切片进行HE染色,观察组织结构改变。 5.4组织生化检查:依照试剂盒说明书,测定所取皮瓣组织MDA含量及 MPO活性,皮瓣组织中蛋白含量用考马斯亮蓝蛋白定量。 UTHSCSATool Image3.0版,每组选择5张切片,每张切片随机取5个互 不重叠的400倍视野,阳性细胞计数后求其平均数。 6统计学处理:应用SASV8软件对数据进行处理。 结果: 1皮瓣大体观察: 术后7天,非.IR组皮瓣未见坏死,全部成活,皮瓣颜色淡红,弹性 较好,可见少量毛发生长。 丹参.IR组皮瓣近端颜色淡红,由近及远逐渐出现血运不良和坏死, 表现为颜色逐渐变暗,远端呈黑色;质地逐渐变硬,远端坏死区表面形成 痂壳,弹性差;原位掀起皮瓣,可见皮瓣略有出血,肉膜下存在少量炎性 分泌物。 IR组坏死区域明显较丹参一IR组多,可见大部分皮瓣坏死,形成大片 黑色痂壳,弹性极差,残留近端少量未坏死组织,但颜色略暗,血运不良, 原位掀起皮瓣,可见皮瓣出血较

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