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专题课题《菊花的组织培养》用.ppt
通过必修课学习,我们已经了解到大多数绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。有没有不用种子来培育植物的方法呢? 营养繁殖:扦插 嫁接 压条 组织培养 ④结果: 为什么体内细胞没有表现出全能性而是分化出不同的组织、器官? 比较脱分化和再分化 ② 酒精处理 用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,放入体积分数为70%的酒精中摇动2-3次,持续6-7s,立即将外植体取出,在无菌水中清洗 ③消毒液处理 取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中1-2min,取出后在无菌水中至少清洗3次,漂净消毒液 * 专题3 植物组织培养技术 一、基础知识 课题1: 菊花的组织培养 1、细胞的分化(复习) ①概念: 在个体发育中,相同细胞的后代在形态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程 ②过程: 受精卵增殖、生长、分化形成组织、器官、系统 ③特点: (2)稳定性: (3)普遍性 (1)持久性: 是一种持久性的变化,它发生在生物体的整个生命过程中,在胚胎期达到最大限度 细胞分化是稳定的,一般是不可逆转的 形成不同的细胞和组织 ⑤原因: 基因在特定的时间和空间条件下的选择性表达的结果 2、细胞的全能性 ①定义: 生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性 ②原理: 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体所必需的全部基因 高度分化的植物细胞能够分化成一个完整的植株,其理论基础是什么? 高度特化的动物细胞,从整个细胞来说,全能性受到限制。但它的细胞核仍然保持着全能性,这是因为细胞核内含有该物种遗传性所需要的遗传物质 已分化的植物细胞,仍具有全能性 ③实例 受精卵生殖细胞体细胞 ④全能性的比较: 植物细胞动物细胞 3、植物组织培养 细胞离体 ① 必要 条件: 一定的营养物质、激素和其他外界条件 ②原理: 细胞的全能性 外植体: (教材34页) 从活植物体上切下进行培养的那部分细胞、组织或器官 ③相关概念: 脱分化: (教材32页) 由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程 再分化: (教材32页) 脱分化产生的愈伤组织继续进行培养,又可以重新分化成根或芽等器官 愈伤组织:(教材32页) 细胞排列疏松而无规则,是高度液泡化的、成无定形状态的薄壁细胞 脱分化 再分化 过程 外植体通过脱分化形成愈伤组织 愈伤组织通过再分化形成幼苗 形成体特点 排列疏松 高度液泡化的薄壁细胞 有根 、芽 需要条件 离体 适宜营养 生长素 细胞分裂素 离体 适宜营养 生长素 细胞分裂素 需光照 (4)植物组织培养过程: 离体组织或细胞 植物体 脱分化 愈伤组织 芽 根 再分化 人参的愈伤组织 菠萝的愈伤组织 2、影响植物组织培养的因素 (1)植物材料的选择 烟草和胡萝卜的组织培养较为容易 枸杞愈伤组织的芽诱导比较难 同一植物材料的年龄、保存时间的长短会影响实验结果 菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝 (2)不同的离体组织和细胞对营养、环境等条件的要求相对特殊,需配置不同的培养基 MS培养基主要成分包括: A、大量元素: N、P、 S 、 K、Ca、Mg等 B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、 Co等 C、有机物: 甘氨酸 烟酸 肌醇 维生素 蔗糖 D 、 植物激素:生长素 细胞分裂素 P33 [讨论]:你能说出各种营养物质的作用吗? 答:微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐;蔗糖提供碳源,同时能够维持细胞的渗透压;甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。 微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同, MS培养基则需提供大量无机营养,无机盐混合物包括 植物生长必须的大量元素和微量元素两大类 同专题2中微生物培养基的配方相比,MS培养基的配方有哪些明显的不同? ①常用的植物激素:生长素、细胞分裂素 生长素类: 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、吲哚丁酸(IBA) 细胞分裂素类: 激动素(KT)、6-苄基嘌呤( 6-BA)、玉米素(ZT) (3)植物激素的影响 ②生长素和细胞分裂素作用 植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在的情况下,细胞分裂素的作用呈现加强的趋势 分化频率高 同时使用 细胞既分裂也分化 先使用细胞分裂素后使用生长素 有利于细胞分裂,但不利分化 先使用生长素,后使用细胞分裂素 实验结果 使用顺序 生长素
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