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人参皂苷Rg1对心肌细胞的影响及其信号传导机制.pdf 6页

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人参皂苷Rg1对心肌细胞的影响及其信号传导机制.pdf
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1096 中国循环杂志 2015 年 11 月 第 30 卷 第 11 期(总第 209 期)Chinese Circulation Journal,November,2015,Vol. 30 No.11(Serial No.209) 基础与实验研究 人参皂苷 Rg1 对心肌细胞的影响及其信号传导机制 刘燃,宋蕊,袁丽,凌露,杨萍,郭家智,张戈,陆地,孙林 摘要 目的:从细胞和分子层面探讨人参皂苷 Rg1(G-Rg1)对心肌细胞的影响及其信号传导机制。 方法:体外培养大鼠 H9c2 心肌细胞,按实验要求随机分 13 组,每组 5 个平行孔,分别为空白对照组,单纯 缺血缺氧 2 h、6 h、12 h、24 h、48 h 组,G-Rg1 5 μmol/L、10 μmol/L、50 μmol/L 组,缺氧诱导因子 -1α(HIF-1α) 的特异性抑制剂(YC-1)组,YC-1+G-Rg1 组,蛋白激酶 B(Akt)蛋白的磷酸化特异性抑制剂(Wortmannin)组, Wortmannin+G-Rg1 组。检测 G-Rg1、缺血缺氧以及 YC-1 对心肌细胞活力及心肌细胞损伤的影响。同时用逆转录聚合 酶链反应(RT-PCR)检测心肌细胞内 HIF-1α、葡萄糖载体蛋白 -1(GLUT-1)和血红素氧合酶 -1(HO-1)的信使核糖 核酸 mRNA 表达水平变化。用蛋白质免疫印迹法检测 HIF-1α、GLUT-1 和 HO-1、活化转录因子 -6(ATF-6)、抑制 CCAAT/ 增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和 Akt 等细胞信号通路蛋白表达水平变化。 结果:缺血缺氧时间与心肌细胞活力呈负相关(r=-0.8580,P<0.05),与乳酸脱氢酶溢出率呈正相关(r=0.9201, μ P<0.05)。G-Rg1 10 mol/L 组较单纯缺血缺氧 24 h 组细胞活力明显回升(87.8%、62.6%,P<0.05),细胞培养上清乳酸脱 氢酶(LDH)含量明显减少(25.0%、74.8%,P<0.05),且上调了 HIF-1α、GLUT-1、HO-1 的 mRNA 表达水平(P<0.05)。 蛋白质免疫印迹法分析显示:YC-1+G-Rg1 组较 G-Rg1 组,心肌细胞活力下降(68.0%,87.8%,P<0.05),细胞培养上清 LDH 含量增加(56.4%,25.0%,P<0.05),同时 YC-1 拮抗了 G-Rg1 对 HIF-1α、GLUT-1、HO-1、ATF-6 和 CHOP 的 蛋白表达水平的调控(P<0.05);Wortmannin 可拮抗 G-Rg1 对 HIF-1α 和 CHOP 的蛋白表达水平的调控(P<0.05),及对 Akt 两个磷酸化位点的激活作用(P<0.05)。 结论:心肌细胞损伤程度与缺血缺氧时间有关;G-Rg1 对心肌细胞具有保护作用,其机制激活 HIF-1α 及其下游因 子的表达并抑制了内质网应激效应,可能与 G-Rg1 激活 Akt 有关。 关键词 人参皂苷 Rg1;磷脂酰肌醇 3 激酶;缺氧诱导因子 -1α;内质网应激;凋亡 Effect of Ginsenoside-rg1 on Rat's Cardiomyocytes With its Mechanism of Signal Pathway in vitro LIU Ran, SONG Rui, YUAN Li, LING Lu, YANG Ping, GUO Jia-zhi, ZHANG Ge, LU Di, SUN Lin. Department of Cardiology Third Ward, The second Affiliated Hospital of Kunming Medical University, Kunming (650101), Yunnan, China Co-corresponding Authors: SUN Lin, Email: sunlinkm@ and LU Di, Email: lud126.com Abstract Objective: To investigate the

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