人参皂苷Rg1对心肌细胞的影响及其信号传导机制.pdf

1096 中国循环杂志 2015 年 11 月 第 30 卷 第 11 期（总第 209 期）Chinese Circulation Journal，November，2015，Vol. 30 No.11（Serial No.209） 基础与实验研究 人参皂苷 Rg1 对心肌细胞的影响及其信号传导机制 刘燃，宋蕊，袁丽，凌露，杨萍，郭家智，张戈，陆地，孙林 摘要 目的：从细胞和分子层面探讨人参皂苷 Rg1（G-Rg1）对心肌细胞的影响及其信号传导机制。 方法：体外培养大鼠 H9c2 心肌细胞，按实验要求随机分 13 组，每组 5 个平行孔，分别为空白对照组，单纯 缺血缺氧 2 h、6 h、12 h、24 h、48 h 组，G-Rg1 5 μmol/L、10 μmol/L、50 μmol/L 组，缺氧诱导因子 -1α（HIF-1α） 的特异性抑制剂（YC-1）组，YC-1+G-Rg1 组，蛋白激酶 B（Akt）蛋白的磷酸化特异性抑制剂（Wortmannin）组， Wortmannin+G-Rg1 组。检测 G-Rg1、缺血缺氧以及 YC-1 对心肌细胞活力及心肌细胞损伤的影响。同时用逆转录聚合 酶链反应（RT-PCR）检测心肌细胞内 HIF-1α、葡萄糖载体蛋白 -1（GLUT-1）和血红素氧合酶 -1（HO-1）的信使核糖 核酸 mRNA 表达水平变化。用蛋白质免疫印迹法检测 HIF-1α、GLUT-1 和 HO-1、活化转录因子 -6（ATF-6）、抑制 CCAAT/ 增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）和 Akt 等细胞信号通路蛋白表达水平变化。 结果：缺血缺氧时间与心肌细胞活力呈负相关（r=-0.8580，P<0.05），与乳酸脱氢酶溢出率呈正相关（r=0.9201， μ P<0.05）。G-Rg1 10 mol/L 组较单纯缺血缺氧 24 h 组细胞活力明显回升（87.8%、62.6%，P<0.05），细胞培养上清乳酸脱 氢酶（LDH）含量明显减少（25.0%、74.8%，P<0.05），且上调了 HIF-1α、GLUT-1、HO-1 的 mRNA 表达水平（P<0.05）。 蛋白质免疫印迹法分析显示：YC-1+G-Rg1 组较 G-Rg1 组，心肌细胞活力下降（68.0%，87.8%，P<0.05），细胞培养上清 LDH 含量增加（56.4%，25.0%，P<0.05），同时 YC-1 拮抗了 G-Rg1 对 HIF-1α、GLUT-1、HO-1、ATF-6 和 CHOP 的 蛋白表达水平的调控（P<0.05）；Wortmannin 可拮抗 G-Rg1 对 HIF-1α 和 CHOP 的蛋白表达水平的调控（P<0.05），及对 Akt 两个磷酸化位点的激活作用（P<0.05）。 结论：心肌细胞损伤程度与缺血缺氧时间有关；G-Rg1 对心肌细胞具有保护作用，其机制激活 HIF-1α 及其下游因 子的表达并抑制了内质网应激效应，可能与 G-Rg1 激活 Akt 有关。 关键词 人参皂苷 Rg1；磷脂酰肌醇 3 激酶；缺氧诱导因子 -1α；内质网应激；凋亡 Effect of Ginsenoside-rg1 on Rat's Cardiomyocytes With its Mechanism of Signal Pathway in vitro LIU Ran, SONG Rui, YUAN Li, LING Lu, YANG Ping, GUO Jia-zhi, ZHANG Ge, LU Di, SUN Lin. Department of Cardiology Third Ward, The second Affiliated Hospital of Kunming Medical University, Kunming (650101), Yunnan, China Co-corresponding Authors: SUN Lin, Email: sunlinkm@ and LU Di, Email: lud126.com Abstract Objective: To investigate the