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人牙髓干细胞在钛金属表面向成骨细胞样细胞分化的实验研究.pdf
北京口腔医学 2015年第23卷第5期 BeijingJournal of Stomatology October2015,Vol.23,No.5 ·249 ·
人牙髓干细胞在钛金属表面向成骨细胞样
细胞分化的实验研究
张晓艳 李小彤 曾祥龙
【摘要】 目的 探讨矿化液诱导条件下人牙髓干细胞(human dentalpulp stemcells,HDPSCs)在钛金属表面向
成骨细胞样细胞分化的潜力。 方法 将HDPSCs接种于钛金属板表面,于第3、7d 时观察其增殖状态。 将 HDPSCs
接种于钛金属板表面进行矿化液诱导,于诱导的第0、3、5、7、14、21、28d 时,采用 RT-PCR检测其牙本质涎磷蛋白
(DSPP)、碱性磷酸酶(ALP)、骨涎蛋白(BSP)和骨钙素(OCN)的基因表达。 Western 印迹分析、免疫荧光检测 BSP
及OCN蛋白表达。 对照组为矿化液诱导培养皿中的HDPSCs,检测指标、方法基本相同,免疫细胞化学染色检测
OCN蛋白表达。 结果 钛金属板上 HDPSCs增殖迅速,表现出良好的生物相容性。 两组细胞均自诱导第 3 天
ALPmRNA呈高表达、DSPP始终不表达。 培养皿组BSP、OCNmRNA于第5天开始表达,并随时间延长而表达增高;
钛金属组BSP、OCNmRNA表达于第 14 天出现第一峰值,随后有所下降,28天再次升高。 两组BSP蛋白表达趋势
与其RT-PCR结果一致,第5 天 OCN染色阳性。 结论 钛金属表面 HDPSCs 经矿化液诱导向成骨细胞样细胞
分化。
【关键词】 人牙髓干细胞;钛金属;成骨细胞样细胞
【中图号】 R349.6 【文献标识码】 A 【文章编号】 1006-673X(2015)05-0249-05
Differentiation of osteoblast-like cells from human dental pulp stem cells on titanium-alloy ZHANGXiao-yan,LI
Xiao-tong,ZENG Xiang-long. Department of Orthodontics, Capital Medical University School of Stomatology, Beijing
100050,China
【Abstract】 Objective To induce human dental pulp stem cells(HDPSCs) on titanium-alloy into osteoblast-like
cellsby mineralizing culture medium. Methods HDPSCswere seeded on titanium-alloy surfaces,the proliferation of the
rd th
cellswas compared on the 3 and 7 day respectively. HDPSCs on titanium-alloy were cultured by mineralizing culture
mediumfor28 days. The gene expression of ALP,DSPP,BSP and OCN on day 0,3,5,7,14,21 and28 was evaluated by
RT-PCR.The protein expressionof BSPand OCNwasanalyzedby Westernblottingandimmunofluorescence. The HDPSCs
cultured by thesamemediuminnormaldishservedascontrol. Thegeneandproteinexpressionforthe
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