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常州二中《基因工程-1
专题一 基因工程
一、考点盘点
内容 等级要求 (1)基因工程的诞生 A (2)基因工程的原理及技术 A (3)基因工程的应用 B (4)蛋白质工程 A
二、知识网络
1.1 DNA重组技术的基本工具
1.2 基因工程的基本操作程序
1.3 基因工程的应用
1.4 蛋白质工程的崛起
三、基础回顾及能力拓展
1、基因工程的原理
问题1:利用基因工程技术,能否对生物的性状进行定向改造?
这种技术应用了哪种可遗传变异原理?
问题2:基因工程能对不同种生物的DNA进行操作的原因是 。
2、DNA重组的基本工具
问题1:限制性核酸内切酶的特点是什么 。
右表限制酶SmaI和限制酶XmaI作用的相同点是,不同点是。
甲处是 键,乙处是 键。
DNA连接酶作用于 (甲、乙)处。
DNA聚合酶作用于 (甲、乙)处。
解旋酶作用于 (甲、乙)处。
纠错笔记:
项目
种类 作用底物 作用部位 作用结果 限制酶 DNA分子 磷酸二酯键 形成粘性末端或平末端 DNA连接酶 DNA分子片段 磷酸二酯键 形成重组DNA分子 DNA聚合酶 脱氧核苷酸 磷酸二酯键 形成新的DNA分子 DNA(水解)酶 DNA分子 磷酸二酯键 形成脱氧核苷酸 DNA解旋酶 DNA分子 碱基对间的氢键 形成单链DNA分子
问题3:在用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒时,需要对质粒改造,构建新的限制酶切位点。I限制酶的识别序列为 ,切割位点在G与A之间。
怎样把左图中的酶切位点改造成 ?
构建需要的限制酶切位点的过程首先用酶处理质粒;然后用DNA聚合酶等处理质粒;再运用酶处理质粒,从而形成新的限制酶切位点。
(1)A端用酶 切割,B端用酶 切割,C端用酶 切割,D端用酶 切割。
(2) 端和 端的粘性末端是一样的。
(3)在重组质粒中,AC连接部分能否被酶1识别并切割?
(4)在重组质粒中,BD连接部分能否被酶2识别并切割?
能否被酶3识别并切割?
(5)两段DNA片段能够拼接的结构基础
除此之外,黏性末端只有 ,端口才能遵循碱基互补原则被DNA连接酶缝合;
而平末端则没有这个要求。
问题4:基因工程中基因表达载体除需具有目的基因外,还有复制原点、 、
、标记基因。如利用转基因奶牛乳腺生物反应器生产人的生长激素时,需要在生长激素编码序列前插入 的启动子。且由生长激素基因表达产物无法推知启动子碱基序列,原因是
研究发现复制原点的碱基序列特点通常含A、T碱基较多,其意义是。
(1)以植物细胞作为受体细胞可采用体细胞,经植物组织培养获得转基因植物,原理是植物细胞的全能性。
(2)要获得转基因动物一般只能以动物受精卵作为受体细胞,因为动物体细胞不能表达全能性。动物基因工程主要是为了改善畜产品的品质或生物乳房发生器生产药物,而不是为了产生体型巨大的个体。
(3)原核细胞作为受体细胞不能对分泌蛋白(如人胰岛素等)进行加工,可以考虑以酵母菌等作为受体细胞。
问题6:一般通过标记基因筛选含有目的基因的受体细胞:
据图回答:
(1)在导入过程中可能会出现三种情况:即将重组质粒导入受体细胞、将质粒A导入受体细胞、没有任何质粒进入细胞;如何去除没有导入质粒的大肠杆菌?
。
原理是 。
(2)如果把已经导入普通质粒A或重组质粒的大肠杆菌,放在含有四环素的培养基上培养,将发生的现象是
,
原理是 。
(3)下图表示运用影印培养法(使在一系列培养皿的相同位置上能出
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