澳大利亚平脐蠕孢霉胆红素氧化酶的产生、特性及其应用的研究.pdf

Code：10225 University Code：B14015 Register 煳炒 Dissertationforthe ofDoctor Degree and of Production，propertiesBODfrom application australiensisHD．1 Bipolaris Candidate： Shi-chen Huang Supervisor： Zhaomin Associate Supervisor： Academic for： Doctor Degree Applied Speciality： Microbiology Date ofOralExamination： University： Northeast ForestryUniversity 万方数据 摘要 摘要 胆红素氧化酶(EC 1．3．3．5)，系多铜氧化酶家族中的一个成员，因其能催化胆红素氧化 为胆绿素而得名。本文从玉米叶片病斑中分离出一株产胆红素氧化酶菌株，通过一系列的生 物化学手段纯化出胞外胆红泰氧化酶，继而对该酶生化、酶学、光谱学、电磁学、电化学特 性及制作成酶电极检测血液中葡萄糖含量等应用作了研究，其结果如下： (1)胆红素氧化酶产生蔺的分离与鉴定 利用常规的微生物分离培养技术，从玉米叶片的病斑中分离出一株产胆红素氧化酶 (BOD)的真菌。在原始发酵液中其酶活为1000U／L。通过形态学、生理学特征和rDNA- ITS(登录号为JN25l 1，属子囊菌门、格孢腔菌目、格孢腔菌科、平脐蠕孢属的澳大利亚平脐蠕孢霉(丑 为BOD的产生提供了新的资源。 (2)产酶条件的优化 aurtraliensis 通过单因素试验从供试的13种碳源、22种氮源中找到了适合R IID．1产生 BOD的适宜碳源为麦芽糖、庶糖、葡萄糖、果糖、可溶性淀粉及海藻糖。适宜的氮源有聚 蛋白胨、大豆蛋白胨、豆饼粉。适宜的诱导剂为CuS04。通过二水平部分因子试验及最陡 爬坡试验设计，从碳源、氮源、诱导剂、培养温度、培养基初始pH及摇床转速七个因素中 找到了对BOD产量影响最显著的三个因素即麦芽糖含量、发酵温度和CuS04含量，通过最 陡爬坡试验寻找到了逼近实验的中心点后，利用响应面法中的BB设计对上述三个主要因素 进行优化，得到：当培养基质中初始组成含量(g／L)为：麦芽糖5，硫酸铜0．32，大豆蛋