动物细胞培养的历史与展望.PPTVIP

從動物細胞培養到組織工程 施秀惠 國立台灣大學生命科學系 嚴重急性呼吸道症候群SARS(severe acute respiratory syndrome) 病原體究竟是冠狀病毒? 副黏液病毒? 或其他? 臺灣與香港的研究進展有落差! 重要關鍵:是否尋獲有感受性的細胞株? 何謂動物細胞培養？ 植物組織培養(plant tissue culture) 生物組成之階層(The hierarchy of biological order) 分子 (molecule) 細胞 (cell) 組織 (tissue) 器官 (organ) 系統 (system) 個體 (organism) 族群 (population) 群聚(community) 生態系(ecosystem) 通稱的動物組織培養(ATC - Animal tissue culture) 究竟在培養什麼? 通稱的動物組織培養 培養對象為(動物)細胞層級 增殖基礎為有絲分裂, 不涉及 減數分裂 獲得初級培養(primary culture)或 細胞株(cell line) Clone- 株,克隆 in vitro culture (體外培養) vs. in vivo(活體) 如何培養動物細胞？ 兩種基本策略 初級組織塊培養法 (primary explant culture) 分散細胞培養法 (dispersed cell culture) 培養環境 培養器材:培養皿、盤、瓶等 培養基:amino acids, vitamins, coenzymes 添加物:血清、生長激素等 培養條件: 氣相、溫度等 利用動物細胞培養技術之優勢和限制 優 勢 控制下的環境 性質已知且均質化的標本 經濟性 限 制 經驗和技術之需求度高 量產之困難 ? 細胞株之穩定性? 最嚴峻的挑戰-污染(contamination) --自始至今皆然 污染物的種類與特徵 偵測方法與操作原則 交叉污染 預防污染方法 消毒(Sterilization) 物理法、化學法、機械法 無菌操作(Aseptic technique) ?學習之宗旨與精髓 動物細胞培養技術之成就與貢獻 病毒學研究 體外(in vitro)培養病毒 1937:黃熱病毒 1949:小兒麻痺病毒…….. 製備疫苗 1954諾貝爾生理醫學獎: Enders, Weller，Robbins 試想:如果開發出SARS,(禽)流感或 AIDS疫苗?! 遺傳學研究 核型(karyotype)分析 例如: 胎兒診斷? 羊膜或絨毛膜穿刺 遺傳代謝疾病診斷 ? 其他重要應用 基因工程 作為基因之增殖與表現系統 癌症研究 ? 基因轉殖動物 人工生殖 潛力與展望 組織工程學 (Tissue engineering)- 2000年5月美國《時代》雜誌列為未來十大熱門工作之首 主要致力於組織和器官的再生與形成 在一個模仿組織與器官形狀的材料中種入細胞，使細胞依照模型長成新的組織與器官，以修復人體組織的缺損。 幹細胞(stem cell)培養 幹細胞是身體所有組織的前身 來源: 胚胎-完整潛能(totipotent)或 豐富潛能(pluripotent)細胞 成體-多重潛能或特定功能(multipotent) 細胞 研究現況與應用目標 疾病與受傷之治療 例如:脊髓傷害之癱瘓(大鼠) 、 帕金森氏症、阿茲海默症、糖尿病、 黏多糖症、類風濕性關節炎等 器官移植 具備無限潛力但受倫理規範 胚胎幹細胞研究規範(Science 2001) 第一級: 絕對禁止(法、瑞士、西、冰島、波蘭) 第二級: 現有細胞株, 不得再以受精卵製造 新細胞株(美國) 第三級: 可使用人工流產與人工生殖之多餘胚胎 (日本、加、澳洲、以色列)