第八章 食品微生物检验的质量控制.pptVIP

七、试剂、染色液及抗血清的质控 染色液的质量控制 染色液要标明配制或购入日期，选用适当的标准菌株作阳性及阴性对照鉴定。 革兰氏染色用金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌制备浓菌悬液进行质量控制，每次质控与标本检测同步进行。 七、试剂、染色液及抗血清的质控 各种染色液的监控菌株 染色液 阳性对照菌 阴性对照菌 监控频度 革兰染色液 金黄色葡萄球菌 大肠埃希菌 每天 抗酸染色液 结核分枝杆菌 每次 异染颗粒染色液 白喉棒状杆菌 每次 荚膜染色液 肺炎克雷伯菌 每批 鞭毛染色液 普通变形杆菌 福氏志贺菌 每次 七、试剂、染色液及抗血清的质控 试剂的质量控制 各类试剂，在配制或购入后均应进行“有效”试验，用已知阳性及阴性菌株进行试验 试剂须根据标示配制，适当储存 对较稳定的试剂如靛基质试剂应在配制时及每周予以检测，凡不稳定的试剂每天使用时均应检测，合格后才能使用 七、试剂、染色液及抗血清的质控 表3 常用试剂的阳性、阴性对照菌株 常用试剂 阳性对照菌株 阴性对照菌株 凝固酶试剂 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 触酶试验用试剂 化脓链球菌 V-P试验用试剂 阴沟肠杆菌 大肠埃希菌 大肠埃希菌 阴沟肠杆菌 氧化酶试剂 铜绿假单胞菌 大肠埃希菌 ? 靛基质试剂 金黄色葡萄球菌 七、试剂、染色液及抗血清的质控 诊断血清的质量控制 购入的沙门菌属、志贺菌属、致病性大肠杆菌的诊断血清必须立即记录其购入日期、观察透明度、色彩有无变化和是否有沉淀物，然后置4℃冰箱保存 使用前应注意检查诊断血清的批号、有效期，如发现浑浊或有絮状沉淀物时，很可能系污染所致，不能再继续使用 七、试剂、染色液及抗血清的质控 诊断血清的质量控制 使用前应以阳性及阴性菌株进行检测，观察其效价及特异性 不得将诊断血清置室温保存,各种诊断血清均应置冰箱中4℃保存 每月用标准菌株进行一次测定 八、检验过程的质量控制 检测质量保证 定期使用有证标准物质和次级标准物质（参考物质）进行内部质量控制。 参加实验室间的比对或能力验证 利用相同或不同方法进行重复检测 对留存的样品进行再检测。 重复计数要求 菌落计数精密度控制直接计数，选择同一标本，要求检验人员进行菌落计数。 自身同一平皿重复计数误差应小于7.7% 实验人员之间同一平皿重复计数误差±18 .2% 自身同一梯度平行加样两皿间相对误差小于7.7% 实验人员之间同一梯度计数误差±18 .2% 不同梯度间菌落计数最终误差小于7.7% 菌种鉴定质控 菌种鉴定质控要求，对所给的微生物菌种，按有关的方法及指标进行生化、血清等方面的鉴定。 鉴定质量评价：鉴定程序是否正确；鉴定方法是否正确；具体操作技术是否熟练，结果报告是否正确。 内部质量控制的推荐频率 菌落计数精密度控制： 1次/3月； 菌种鉴定控制： 1次/半年或1年 九、标准菌株的来源和保存 标准菌株要求 必须是形态、染色反应、生理生化及血清学特性典型而稳定的菌株 实验结果重复性好，极少发生变异 国际社会认可 来源于专门机构 九、标准菌株的来源和保存 标准菌株来源 美国典型菌种保藏中心ATCC 卫生部药品生物制品检定所菌种保藏中心 国家医学微生物菌种保藏中心 九、标准菌株的来源和保存 标准菌株的保存方法 冷冻干燥法： 最理想的保存方法，不改变菌种性状，保存时间长 手续繁琐，需专门的冷冻干燥设备 菌种保存中心均采用此法 九、标准菌株的来源和保存 标准菌株的保存方法 冰冻保存法： 此法较简单，将细菌混悬于脱纤维羊血或脱脂牛奶中，置液氮或-20℃冰箱保存 但细菌经多次转种，性状可能发生变异 九、标准菌株的来源和保存 标准菌株的保存方法 培养基保存法：最简易方便的方法，适用于大多数实验室 （1）普通琼脂斜面保存法：适于一般细菌的保存，置4℃冰箱可保存1个月。 （2）血琼脂斜面保存法：适于链球菌，可半月转种一次。 （3）半固体穿刺法：穿刺培养基并加液体石蜡，置4℃冰箱可保存3-6个月，适用于肠杆菌科细菌。 九、标准菌株的来源和保存 食品微生物检验实验室必备质控菌株： 大肠埃希菌 ATCC25922 大肠埃希菌 ATCC35218 铜绿假单胞菌 ATCC27853 金黄色葡萄球菌 ATCC25923 粪肠球菌 ATCC29212 十、实验室安全防护 培训与告之 警示标志 防