《吉富罗非鱼感染无乳链球菌后肝脏组织在不同时期蛋白质组的表达差异-论文》.pdfVIP

第 37卷第 12期 水 产 学 报 VOI．37．No．12 2013年 l2月 JOURNAL OFFISHERIESOF CHINA Dec．，2013 文章编号 ：1000—0615(2013)12～1821—08 DOI：10．3724／SP．J．1231．2013．38820 吉富罗非鱼感染无乳链球菌后肝脏组织 在不同时期蛋 白质组的表达差异 朱佳杰 ，沈夏霜 ，付 强 ， 陈 明 ，周 宇 ，谭 芸 ，甘 西 (1．广西壮族 自治区水产科学研究院，广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室，广西 南宁 530021； 2．广西大学生命科学与技术学院，广西 南宁 530004) 摘要 ：为研究罗非鱼感染无乳链球菌前后肝脏组织蛋白质的表达变化。本研究以吉富罗非鱼 为材料，采用双 向电泳技术分析其在无乳链球菌感染胁迫下24h、48～144h、12d与对照组 (未感染)肝脏组织蛋 白质组的变化，对差异表达蛋 白进行质谱分析鉴定。结果显示：吉富罗 非鱼在无乳链球菌胁迫下，3个实验组 的蛋 白质 图谱与对照组相 比存在显著差异，共有 30个 蛋 白质点发生显著改变，其 中 13个表达上调，l5个下调，2个蛋 白质点在感染 12d后消失。 通过MALDI—TOF／TOF4800质谱分析和数据库检索对这些蛋 白质进行 了功能分类，发现它们 涉及到能量代谢、细胞防御与应激、消化免疫 、抗氧化与排毒等许多方面。推测这些蛋 白质可 能在吉富罗非鱼对无乳链球菌胁迫的抗性反应中发挥 了重要作用 。研究结果为无乳链球菌疫 苗的研制及吉富罗非鱼抗病品种选育奠定 了基础。 关键词 ：吉富罗非鱼；无乳链球菌；蛋 白质组学；双 向电泳 中图分类号：S94I．42 文献标志码 ：A 无乳链球 菌 (Streptococcusagalactiae)是一 electrophoresis，2-DE)是蛋 白质组学研究 中的关 种革兰氏阳性菌 ，广泛分布在 自然界 中，也是一种 键技术之一 。其原理是依据蛋白质的等 电点 全球性的传染性病原菌 ¨。近年来 ，随着罗非鱼 进行第一项的等 电聚焦和依据分子量的不 同进行 养殖业发展 ，不少养殖户盲 目追求养殖密度 ，造成 SDS—PAGE凝胶电泳 ，通过 2次方 向垂直 的电泳 ， 罗非鱼病害频发 ，其中无乳链球菌病危害最严重 。 将样品中的不同蛋白呈点状分离。目前蛋 白质组 2009--2013年无乳链球菌病在我 国罗非鱼主产 学 已在水产 动物育种 中开展 了一系列研究， 区大面积暴发流行 ，发病死亡率逐年上升 ，给 Rattanarojpong等 用黄头病毒感染凡纳滨对虾 养殖户造成了重大的经济损失 ，严重影响 了罗非 (Litopenaeusvannamei)，发现 SCP钙结合蛋 白在 鱼养殖业 的健康持续发展 。为此 ，研究无乳链 病毒感染对虾 的免疫应答 中起着重要作用 ，Yu 球菌对罗非鱼的致病机理 ，实现对无乳链球菌病 等 在 大黄鱼 (Larimichthyscrocea)脾脏 中发现 的有效防控 ，已成为罗非鱼育种工作者 的首要 了若干与免疫应答及炎症调节相关蛋白。目前 国 任务。 内对罗非鱼链球菌病的研究主要集 中在流行病学 蛋 白质组学 (proteomics)是生命科学研究领 分析… 、病理学变化 、菌株分型 ”、疫苗 域中的一门新兴学科 ，蛋 白质是动物组织和细 研制 ¨及抗病相关基因表达 ¨ 等方面 ，在 蛋 白 胞赖以生存 的各种代谢和调控途径 的主要执行 质组水平的研究报道甚少 。本研究采用双向电泳