小鼠心肌肥厚、心衰发展过程中电生理重构及机制的分析.pdf

英文缩写 21 中文摘要 小鼠心肌肥厚、心衰发展过程中电生理重构及其机制研究 摘 要 心肌肥厚、心衰是高血压、缺血性心肌病、心瓣膜病等许多心血管 疾病的常见合并症，心肌肥厚、心衰常常伴发心律失常，特别是心衰期心 源性猝死(SCD)的发生率大大增加。近年来，尽管在心衰的药物治疗上 已取得很大的进展，但心衰病人的死亡率仍然较高。故揭示心肌肥厚、心 衰病理过程中心律失常产生的分子机制，寻找有效的防治措施，是心血管 领域研究的重要课题。 在心肌肥厚、心衰发展中，伴随着心肌组织学上肥厚性重构变化，心 肌细胞的电生理特性亦发生重构性改变，主要表现为复极化过程延迟而致 动作电位时程(action duration，APD)延长，目前对此病理情况 potemial 下APD延长如何诱发心律失常产生的机制仍了解不多。近年的实验发现， of 左心室跨壁复极离散度(transmural dispersion 大在折返性室性心律失常的发生和维持中起重要作用。迄今，尽管有实验 显示心衰时TDR增大，但心肌肥厚、心衰病理模型的跨壁APD变化报道 结果不一。 心肌动作电位时程取决于去极化和复极化电流相互之间精细的平衡， 任何内向电流的增加或／和外向电流的减少均可使其延长。实验表明，L．型 Ca电流(如a．L)的变化依实验动物的种类和心衰进展的程度报道结果不一， 而瞬时外向钾电流k的下调则似是较为普遍的现象。已在不同原因所致 的多种实验动物(包括狗、兔、大鼠、猫等)心肌肥厚、心衰模型及心衰 的人心室细胞上观察到如的减小。故对k在心肌肥厚、心衰病理状况下 的变化成为目前该领域研究的热点。然而，小鼠作为目前电生理研究常用 的模型动物，心肌肥厚、心衰时对厶有限的几篇报道结果却极不一致。 除‰外，参与心室复极化的电压依赖性K+电流尚有k，sl。。和如，在病理 情况下k．sI。。和厶。的改变却报道很少。另外，心肌肥厚、心衰时K+电流 改变的细胞内信号传导通路尚不清楚。 本实验拟在小鼠心肌肥厚、心衰模型上，采用膜片钳技术，观察不同 病理发展阶段小鼠心室肌内膜下、外膜下心肌细胞动作电位、L-型钙电流 中文摘要 (，ca．L)、电压依赖性K+电流k、永。fow及尽随时间变化的特点，并通过 变可能的细胞内信号传导通路，为揭示心肌肥厚、心衰的电生理重构特征 及其机制提供实验依据。 第一部分心肌肥厚和心衰不同时期小鼠左心室跨壁动作电位的变化 目的：观察了小鼠由健康正常状态逐渐向心肌肥厚、心衰转变过程中， 左室游离壁心内膜下、心外膜下细胞动作电位时程及跨壁异质性的变化， 为揭示心律失常产生的细胞机制提供实验依据。 方法：(1)动物模型制备：将小鼠深麻醉后开胸，暴露主动脉弓，部 分分离：用外径0．4mm针头与主动脉弓平行结扎，抽出针头，使主动脉弓 狭窄65％．70％。术后左心室后负荷增加，血液流出受阻，造成压力超负荷 性心肌肥厚和心衰的动物模型；观察动物的一般状况并测定心指数和血流 膜下心肌细胞：取下酶解好的心脏，将左室游离壁的心底和心尖部去掉， 用眼科剪平行于左室游离壁中间部分分别剪取心内膜下心肌(O．5mm左 目筛网过滤，获得的细胞在室温(23℃～25℃)下静置2h后备用。(3) mV以上的 采用打孔式膜片钳技术记录单细胞动作电位，静息膜电位在．65 细胞予以波宽10ms，1Hz的方波，100％～120％阈电流诱导动作电位， mV，超级化，20mV得 90％的时程(APDgo)。在电压钳下以钳制电压为．40 到的细胞电容电流积分值，计算出细胞电容。 结果：(1)小鼠主动脉弓不完全狭窄术后，2～7N心质量指数和血 流动力学各参数呈进行性上升，该时期为代偿性心肌肥厚阶段；