新型DNA酶比色纳米生物传感器的构建和其应用研究.pdfVIP

论文摘要 本文基于金纳米粒子DNA酶双催化和磁性纳米粒子，以凝血酶蛋白(thrombin) 为研究对象构建了一种新型的比色纳米传感器。金纳米粒了表面标记上一种具有催 化性质的DNA酶和核酸适体(TBA)，与固定在磁性纳米粒了上的互补核酸杂交， 形成核酸适体传感器。在凝血酶蛋白的存在下，核酸适体更倾向于与凝血酶蛋白结 合形成G．四分体结构，使得原来的双链解离，标记有DNA酶的金纳米粒子游离出 来。游离出来的标记有DNA酶金纳米粒子具有双催化的功能，在H202的存在下， 可催化氧化ABTS产生蓝绿色的氧化产物，达到了扩增比色检测凝血酶蛋白的目的。 由于利用双催化的高灵敏度，该传感器对凝血酶的检测可达到0．1nM。这种检测方 法成本低、简单、快速、灵敏度高、特异性好，有望为其他生物分子的检测提供一 种多样化的于段。 第三章基于多段对称型DNA酶构建比色生物传感器高灵敏检测 凝血酶蛋白质的研究 多段对称型DNA酶是一种相比于普通一段式DNA酶能更灵敏地检测核酸或蛋白 质的G一四分体结构的新型活性酶，因此广泛被应用在各种生物分予检测上。本文结 了两种高灵敏信号扩增的比色适体传感器。“Signal-off型是一个灵敏的、完全 的DNA结构的适体传感器。它利用核酸适体(TBA)对凝血酶蛋白的高特异性识别 以及多段对称型DNA酶为扩增信号元件来构建的，可以用于凝血酶的检测。该适体 传感器简单，成本低，但是检测中易受外界干扰产生假阳性信号，影响目标检测。 “Signal—on”型适体传感器利用磁纳米颗粒并通过目标诱导的取代反应实现了对 凝血酶的高灵敏高特异性检测，避免了假阳性信号的干扰。该适体传感器对凝血酶 的检测在凝血酶浓度为1到40nM之间具有良好的线性关系，检测限为lnM。此新型 的纳米生物传感器制作简单，检测有很高的特异性和灵敏度，并有望应用于生物医 学领域检测凝血酶。 关键词 金纳米粒子，DNA酶，磁纳米颗粒，核酸适体，凝血酶，比色 II ABSTRACT forrombin based Oilthecolorimetricdetectionth Study protein Oil and DNAzymenano—-aptasensors G—quadruplex ABSTRACT The ofHumanGenome the era genome accomplishment Projectproclaimedpost made and detectionbecomea of proteomicstrategiesprotein topic coming．which the ofhuman researchinterestinlifescience．Proteinsare fundamental body components and an roleinlife areclosedrelatedtohumanhealth． play important activities．So，they Theresearchon structureand fun