中华鲟外周血细胞的显微结构.pdf

长江大学学报 (自然科学版) 2015年7月第12卷第21期 (农学下旬TU) · 22 · JournalofYangtzeUniversity(NaturalScienceEdition) Ju1．2015，Vo1．12No．21 [引著格式]姚德冬，柴毅，王毅 ，等．中华鲟外周血细胞的显微结构 EJ]．长江大学学报 (自科版)，2015，12(21)：22~26，8O 中华鲟外周血细胞 的显微结构 姚德冬 ，柴毅 ，王毅 ，郭坤 ，黄俊 (长江大学动物科学学院，湖北荆州434025) [摘要]采用常规方法对 中华鲟 (Acipensersinensis)血细胞 的形态、数量和大小进行 了观测 。在光学显 微镜下可鉴别 出红细胞 、血栓细胞 、淋 巴细胞、单核细胞 、中性粒细胞 、嗜酸性粒细胞 ，未发现嗜碱性 粒细胞 。中华鲟外周血细胞 中红细胞 占大多数 ，其密度为 (4．82±0．15) ×10“个 ／L， 白细胞数量较少 。 在 白细胞 中，血栓细胞数量最多[(48．56±1．38) ]，其次是淋 巴细胞[(32．444-1．92)％]，嗜酸性粒细胞 最少[(o．37±0．14) ]；嗜中性粒细胞体积最大[(20．29-41．62) × (16．07-42．89) ]，淋 巴细胞 体积最小l(9．74_4-2．65)um× (7．2O±0．97)Izm l。 [关键词] 中华鲟 (Acipensersinensis)；血细胞 ；显微结构 [中图分类号]Q952：Q959．46 3 [文献标识码]A [文章编号]1673—1409 (2015)21—0022—05 血细胞是鱼类机体免疫的重要组成部分 ，对维持鱼类机体 内环境的稳定有重要作用 ，其部分参数可 反映鱼类的健康状况l1]。国内外有很多关于鱼类血细胞形态结构的研究_2叫]。 中华鲟 (Acipensersinensis)隶属鲟形 目 (Acipenseriformes)鲟科 (Acipenseridae)鲟属 (Aci— penser)，主要分布在长江流域 ，是典型的溯河洄游鱼类 。由于过度捕捞 、葛洲坝等水利工程建设、江 上作业和水域污染等原因，中华鲟野生种群数量急剧下降，1988年中华鲟被列为国家一级保护动物_】。 目前有关中华鲟 的研究报道主要集 中在人工繁殖 、行为学 、生理生化等方面的研究_】”]，但是专 门对 中华鲟外周血细胞形态结构的研究 比较少。本研究对 中华鲟血细胞的显微结构进行观察 ，旨在为中华鲟 血液学、疾病诊断的研究提供基础数据 。 1 材料与方法 1．1 试验材料 选取 4尾养殖中华鲟进行血液样品采集 。实验鱼健康状况 良好 ，均为雌性 ，体长 162～182cm，体 重 2O．7～36．7kg。 1．2 试验方法 1．2．1 采血方法 用帆布担架捞取实验鱼后 ，腹部朝上，鳃部供水 。擦去臀鳍后的水分 ，用 5mL一次性注射器 自尾 鳍基部下方的尾静脉抽取静脉血 2mI，迅速将血液注入附有 EDTA—K 的抗凝管中，颠倒 180度 5～8 次混匀后 ，放人 4℃冷藏箱 中，带回实验室待测。 1．2．2 红细胞密度统计 按林浩然 的方法进行。 1．2．3 白细胞分类计数和各类血细胞大小测量 抗凝血在干净载玻片上涂片，晾干 ，用瑞氏一吉姆萨染液联合染色。在 Ieica显微镜油镜下进行血 [收稿 日期]2015—04—01 [基金项 目]香港海洋馆保育基金项目 (4040000027)。 [作者简介]姚德冬 (1989一)，男，硕士生，研究方向为鱼类生理学。通信作者 ：柴毅 ，chaiyi123456@126．CON?,。 第 12卷 第 21期 姚德冬等 ：中华鲟外周血细胞的显微结构 细胞观察、测量细胞大小 ，用南京倍 宁医学病理成像 系统进行观察 、拍 照。每尾实验鱼制作 2张血涂 片 ，每张涂片上计数 200个 白细胞 ，对 1600个 白细胞进行分类计数 。在测量细胞大小时，除数量极少 的嗜酸性粒细胞外 ，其余各种血细胞大小取 50次测量平均值 。 1．3 数据 处理 实验数据用 Excel软件进行处理 ，结果均 以平均值 ±标准差 (Mean±SD)表示 ；照片用 Photo— shop7．0进行处理 ，同比例缩放 图像和标尺 。 2 结果与分析 2．1 中华鲟外周血细胞的显微形态结构 通