白芸豆中α-淀粉酶抑制剂糖蛋白的提取纯化、组成结构及其生物活性分析.pdf

摘 要 本文采用现代分离纯化技术从白芸豆中分离提取得到单一组分的0【．淀粉酶 抑制剂(Q．舢)糖蛋白，对其生物学性质、超滤提取工艺、生物降糖、降脂活性 及结构与功能之间的构效关系进行了系统的研究。 采用柱色谱分离技术从白芸豆中分离得到单一组分的甜舢，其为相对分子量 为36000Da的糖蛋白，对猪胰旷淀粉酶具有较高的抑制活性，抑制类型呈非竞 争性抑制。白芸豆0c枷糖蛋白对温度、pH具有较高的稳定性。 白芸豆a．舢糖蛋白中蛋白质含量占88．2％，蛋白质中含有17种常见氨基酸， 其中天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸和苏氨酸占有较高的比例；糖链中单糖组成为甘 露糖、葡萄糖、半乳糖和木糖，其摩尔比为2．42：1．50：1．52：1．00，糖链中单糖 残基以c【．糖苷键连接。糖蛋白中蛋白质和糖链的连接方式为O．糖肽键。构效关 系研究结果表明a．AI糖蛋白中单独的糖链和蛋白链都没有生物活性，只有糖链 和蛋白链结合在一起形成完整的糖蛋白时，才对猪胰Q．淀粉酶具有抑制活性。 分别采用有机膜超滤和无机膜超滤对白芸豆提取液中a．舢糖蛋白的浓缩提 取工艺进行了对比研究。结果表明截留分子量为10000Da的有机超滤膜更适合 白芸豆中a．灿糖蛋白的分离浓缩。其最佳工艺条件为操作压力O．8MPa，物料质 量分数7％(1：15)，物料温度35℃，物料pH为自然pH。在此条件下，其稳定膜 通量为35．6Um2h，体积浓缩倍数为8．3倍，多糖的截留率为20．1％，蛋白质的 截留率为72．7％，活性物质收率为80．6％。 对白芸豆中a．～的食用安全性和生物降糖、降脂活性进行了研究。结果表 明0【．灿无急性毒性；Q．舢能显著降低四氧嘧啶糖尿病大鼠的空腹血糖，降低餐 后血糖峰值，增加其淀粉耐量；a．越能显著降低高血脂模型大鼠血清的TG、TC 和LDLC含量，升高HDL广C含量，具有调节高血脂模型大鼠血脂的功效。 关键词：白芸豆；Q．～；提取纯化；组成结构；超滤；生物活性 Abstract A homogeneousglycoproteiIl0【-锄ylase aseriesofmodem white“dneybe强s(融口seD胁sy“自弘，．西．L)by purified五rom nebiochemical ultra五ltration technolo酉es． char拟erization， technology， andstrIJcture／functionwe佗 hypo百yc锄ic，hypolipidemicactiVity relationship studiedintllisdissertation． systematically wllite a An甜舢w丛purified仃omkidneybe锄s㈣口s印伽阳枷廊．L)by w弱a w弱 seriesof 36000Da Chromato伊aphy．n efI．ective and againstporcinepancreaticamyl嬲e 0【-m of w弱stableto illllibition．ne拟ivity pH蛆dt锄pe船tllre． Thea·AI contained wasrich in嬲panicacid，