肝X受体在人肾小球内皮细胞血栓调节蛋白表达中的作用.pdfVIP

脏痘 志2Q!垒生 3Q鲞第4期 ChinJNeDhrol，ADril2014．V01．30．No．4 · 299· 基 础 研 究 · 肝X受体在人肾小球内皮细胞血栓 调节蛋 白表达中的作用 丁涵露 王楠 阮一哲 汪伟 张萍 王莉 摘【要】 目的 探讨肝X受体 (LXR)激动剂T0901317对人。肾小球内皮细胞血栓调节蛋白 (TM)表达的影响及可能机制。 方法 不同浓度的T0901317刺激人。肾小球内皮细胞不同时间 后 ，采用Western印迹检测LXRo~、LXRI3表达 ；实时定量PCR、Western印迹及免疫荧光法检测 T0901317对TMmRNA和蛋白表达的影响。LXRa、LXR3[基 因干扰片段Si—hLXRct、Si—hLXRI3均 以 100nmol／L的浓度转染人 肾小球 内皮细胞 ，采用 Western印迹 、实时定量 PCR法检测 si— hLXRct、Si—hLXRI5对TM蛋 白和mRNA表达 的影 响。 结果 人肾小球内皮细胞表达LXRoL、 LxRB。与正常细胞组及DMSO对照组相 比，T0901317可促进人 肾小球 内皮细胞TM表达 (P 0．05)，且呈时间和剂量依赖性。Si—hLXRc~组TM表达显著低于对照组 (P0．05)，而Si—hLXRI3 组TM表达与对照组差异无统计学意义。 结论 人。肾小球 内皮细胞表达LXRct和LXR3[。LXR 激动剂T0901317可能主要是通过激活LXRc~促进人肾小球内皮细胞TM表达。 【关键词】 肾小球 ； 内皮细胞 ； 血栓调节蛋白； 肝x受体 EffectofliverX receptoron thethrombomodulin expression in humanglomerularendothelial cells DingHanlu，WangNan,RuanYizhe，WangWei,ZhangP WangLi．Departmentof Nephrology,SichuanProvincialPeople Hospital,Chengdu610072，China Correspondingauthor：WangLi，Emaihscwangli62@I63．con 【Abstract】objective ToexploretheroleofliverX receptorfLXR1agonistT0901317on thrombomodulin(TM)expressioninhumanglomerularendothelialcellsandthepossiblemechanisms． Methods DifferentconcentrationsofTO901317wereusedtostimulatehuman glomerularendothelial cellsfordifferenttime，thenLXRoL，LXR3[expressionweredetectedbyusingWestern blottinganalysis； therolesofT0901317onTM mRNA andTM proteinexpressionwereobservedbyusingreal—timePCR， Western blottingandimmunofluorescenceassay．LXRcL，LXRI3geneinterferencesegmentSi-hLXRa，Si — hLXR5[weretransfectedintohumanglomerularendothelialcellswiththeconcentrationof100nmol／L respectively，thentherolesofSi—hLXRa，Si—hLXRI3ontheTM proteinandTM mRNAexpressionwere assayed by Western blotting and realtime PCR． Results Human glomerular endothelialcells expressedLXRctandLXR~[．ComparedtothenormalcellsandDMSO group，T0901317could sign