计算机虚拟筛选技术应用---“高原舒”复方产品研制.docVIP

计算机虚拟筛选技术的应用---“高原舒”复方产品的研制 药物的提取与分离 1.1柳茶 . 取粗枝叶粉碎，共1088g。依次用石油醚，EtOAc和EtOH八倍量回流提取，每次3h,分别抽滤回收溶剂，得各部浸膏38.7g,86.2g,73.9g。 1.2黄芪 干燥黄芪粉碎，共499g。乙醇回流提取3次，每次6倍乙醇提取2h，抽滤合并提取液，回收溶剂得浸膏127.6g，加6倍水稍加热使之悬浮。分别以石油醚 2.1.3当归【4】 当归生药粉碎，共319g。分别用8倍量70%甲醇、30%甲醇和水，回流提取3h，抽滤回收溶剂。得各部浸膏164.7g，44.9g，26.5g。 2.2 动物实验 2.1实验小鼠的喂养 取健康成年昆明鼠48只，雌雄各半。随机分为6组，每组4只雌鼠4只雄鼠，分装在各笼中。第一组蒸馏水（0.2ml/10g）,第二组柳茶浸膏混合溶液（0.2ml/10g 相当于原药材0.366g/10g），第三组当归浸膏混合溶液（0.2ml/10g 相当于原药材0.108/10g），第四组黄芪浸膏混合溶液（0.2ml/10g 相当于原药材0.222/10g），第五组柳茶黄芪当归浸膏2 : 0.5 : 1混合溶液（0.2ml/10g相当于原药材柳茶0.076g黄芪0.063g当归0.009g/10g）第六组柳茶黄芪当归浸膏1 : 0.1 : 0.5混合溶液（0.2ml/10g相当于原药材柳茶0.040g黄芪0.013g当归0.005g/10g）。每日上午喂食喂水控制体重，晚上灌胃给药。 2.2.2 小鼠抗缺氧检测 给药一周，观察记录小鼠行为45分钟分别封装在广口瓶中，记录各小鼠死亡时间。 s 表示，组间比较采用t检验，P0.05 为差异有统计学意义，P0.01具有显著统计学意义。 3实验结果 3.1计算机模拟分子对接结果 与NO合酶对接较好的成分 柳茶 鲜卑花酯-14.5126 正二十四烷酸-12.771 十八酸-12.5869 二十醇-12.5713 咖啡酸-12.5538 黄芪 毛蕊异黄酮-7-O-β-D葡萄糖苷-17.3421 2 ，4 -二甲氧基．3 -羟基．异黄烷-6-0-13-葡萄糖苷-16.5519 半乳糖醛酸-15.7238 山奈酚-7-O-葡萄糖苷-15.4213 7-羟基-3 ，4 二甲氧基-2 ，5 -二葡萄糖异黄烷苷-15.0359 当归 肉豆寇酸-14.3427 胱氨酸-13.5605 蔗糖 -13.5217 谷氨酸 -13.327 邻苯二甲酸-13.1793 3.2动物行为学观察 试验期间，大鼠毛色光滑，进食量稳定，与正常组相比活动增加。 3.3各药物提取液对小鼠抗缺氧时间的影响 表1-1 各药物提取液对小鼠抗缺氧时间的影响（s） 组别 N 小鼠抗缺氧时间 /min 1空白组 5 27.4600±1.47919 2柳茶提取物混合组 6 43.8333±5.98888aaa 3当归提取物混合组 8 31.2500±2.81780bbb 4黄芪提取物混合组 8 39.9625±5.15085aac 5柳茶：黄芪：当归=2:0.5:1 6 39.6167±10.40662aac 6柳茶：黄芪：当归= 1:0.1:0.5 7 41.3286±9.13906aaacc 与空白组作比较，a :P0.05,aa:P0.01,aaa:P0.001; 与柳茶组做比较，b :P0.05,bb:P0.01,bbb:P0.001; 与当归组做比较，c :P0.05,cc:P0.01,ccc:P0.001;与黄芪组做比较，d :P0.05,dd:P0.01,ddd:P0.001; 与混合组2:0.5:1作比较，e :P0.05,ee:P0.0,eee:P0.0011; 与混合组1:0.1:0.5作比较，f :P0.05,ff:P0.01,fff:P0.001。 结果表明，柳茶组，黄芪组，柳茶：黄芪：当归=2:0.5:1组，柳茶：黄芪：当归= 1:0.1:0.5组相对于空白组都可明显提高小鼠抗缺氧的时间，增强小鼠耐氧能力。柳茶组，黄芪组，柳茶：黄芪：当归=