第七章原核基因表达调控精品.pptVIP

概 述 组成性表达： 适应性表达 指环境变化容易使表达水平变动的一类基因表达。 适应环境条件变化基因表达水平增高的现象称为诱导，这类基因被称为可诱导的基因(inducible gene)； 随环境条件变化而基因表达水平降低的现象称为阻遏，相应的基因被称为可阻遏的基因(repressible gene)。 基因表达的规律——时间性及空间性 时间特异性 (temporal specificity) 某些基因的表达严格按特定的时间顺序生，称之为基因表达的时间特异性。 多细胞生物基因表达的时间特异性又称阶段特异性(stage specificity)。 空间特异性(spatial specificity) 在个体生长全过程，某种基因产物在个体按不同组织空间顺序出现 一、原核基因表达调控总论 (1) 转录水平上的调控; (2) 转录后水平上的调控; ①? mRNA加工成熟水平上的调控 ②? 翻译水平上的调控 原核生物中，营养状况（nutritional status）和环境因素（environmental factor）对基因表达起着举足轻重的影响。 在转录水平上对基因表达的调控决定于DNA的结构、RNA聚合酶的功能、蛋白因子及其他小分子配基的相互作用。 乳糖操纵子结构 （1）根据操纵子对调节蛋白（阻遏蛋白或激活蛋白）的应答机制不同，可分为： 正转录调控 负转录调控 可诱导调节：结构基因在特殊代谢物或化合物的作用下，由原来关闭的状态转变为工作状态。例如：大肠杆菌乳糖操纵子 可阻遏调节：基因平时是开启的，处在产生蛋白质或酶的工作过程中，由于一些特殊代谢物或化合物的积累而将其关闭，阻遏了基因的表达。 例：色氨酸操纵子 （3）在负转录调控系统中，调节基因产物是阻遏蛋白，起着阻止结构基因转录的作用。根据其作用特征又可分为负控诱导和负控阻遏： 在负控诱导系统中，阻遏蛋白与效应物（诱导物）结合时，结构基因转录； 在负控阻遏系统中，阻遏蛋白与效应物（辅阻遏物）结合时，结构基因不转录。 (4)σ因子参与大肠杆菌基因表达调控 存在6种σ因子，其中σ70是调控最基本的生理功能如碳代谢、生物合成等基因的转录所必须的。?除参与氮代谢的σ54外，其它5种σ因子在结构上具有同源性，所以统称σ70家族。 大肠杆菌中的各种σ因子比较 3、弱化子对基因活性的影响 属于这种调节方式的有大肠杆菌色氨酸操纵子、苯丙氨酸操纵子、苏氨酸操纵子、异亮氨酸操纵子等。 起信号作用的是有特殊负载的氨基酰-tRNA的浓度，在色氨酸操纵子中就是色氨酰-tRNA的浓度。 当操纵子被阻遏，RNA合成被终止时，起终止转录信号作用的一段核苷酸被称为弱化子。 有葡萄糖存在的情况下，即使在细菌培养基中加入乳糖、半乳糖、阿拉伯糖或麦芽糖等诱导物，与其相对应的操纵子也不会启动，产生出代谢这些糖的酶来，这种现象称为葡萄糖效应或称为降解物抑制作用。 5、细菌的应急反应 细菌在紧急状况，如氨基酸全面匮乏时。会产生应急反应，包括生产各种RNA、糖、脂肪和蛋白质在内的几乎全部生物化学反应过程均被停止。实施这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸（ppGpp）和鸟苷五磷酸（pppGpp）。产生这两种物质的诱导物是空载tRNA。 二、乳糖操纵子(lac operon) 乳糖操纵子的结构 酶的诱导——lac体系受调控的证据 乳糖操纵子调控模型 影响因子 Lac操纵子中的其他问题 Z编码β-半乳糖苷酶：将乳糖水解成葡萄糖和半乳糖 Y编码β-半乳糖苷透过酶：使外界的β-半乳糖苷（如乳糖）能透过大肠杆菌细胞壁和原生质膜进入细胞内。 A编码β-半乳糖苷乙酰基转移酶：将乙酰辅酶A上的乙酰基转到β-半乳糖苷上，形成乙酰半乳糖。 有两个矛盾是操纵元理论所不能解释的： ①诱导物需要穿过细胞膜才能与阻遏物结合，而转运诱导物需要透过酶，后者的合成又需要诱导物诱导。 解释： 一些诱导物可以在透过酶不存在时进入细胞？ 一些透过酶可以在没有诱导物的情况下合成？ ②真正的诱导物是异构乳糖而非乳糖，前者是在β-半乳糖甘酶的催化下由乳糖形成的，因此，需要有β-半乳糖甘酶的预先存在。 解释： 本底水平的组成型合成：非诱导状态下有少量的lac mRNA合成。 培养基：甘油 按照lac操纵子本底水平的表达，每个细胞内有几个分子的β-半乳糖苷酶和β-半乳糖苷透过酶； 培养基：加入乳糖 少量乳糖 诱导物的加入和去除对lac mRNA的影响 乳糖操纵子的调控模型 乳糖操纵子的组成：大肠杆菌乳糖操纵子含 Z、Y、A 三个结构基因，分别编码半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰转移酶，此外还有一个操纵序列 O，一个启动子 P 和一个调节基因I。 阻遏蛋白的负