内源乳化凝胶法备嗜热链球菌微胶囊及其性质的研究.pdfVIP

内源乳化凝胶法制备嗜热链球菌微胶囊及其性质的研究 摘要 肠道益生菌群是构筑肠道粘膜屏障的主要组成部分，为机体抵御病原菌的侵 袭提供强大的生物屏障，在维持肠道功能及机体的健康方面发挥着重要的生理作 用。通过微胶囊化能将益生菌菌体与外界环境分开，避免其受损害，利于储存和 运输；采用肠溶性壁材，能防止胃液破坏，使其到达肠道遇肠液后溶解，从而使 尽可能多的菌体到达肠道并定植于肠粘膜上，真正起到保健和治疗的作用： 本文以嗜热链球菌为模式菌株，以内源乳化凝胶法对其进行包埋，得到微米 级壳聚糖／海藻酸微胶囊，并研究了其在模拟胃肠道环境下的释放性和耐受性， 从而可以得到以下结论： (1)内源乳化凝胶法制备微胶囊的最佳条件：海藻酸钠浓度为159·L-1， 通过对酪蛋白的包埋及其释放特性研究，得出最佳的壳聚糖覆膜条件为壳聚糖浓 度4mg／mL，壳聚糖溶液pH=6，成膜反应时间10min。 STl)高密度培养基，最适 (2)优化嗜热链球菌(Streptoccusthermophilus 碳源为蔗糖，最佳浓度为0．5％；最适氮源为大豆蛋白胨，最佳浓度为2．0％；适 量的酵母膏和吐温80能促进嗜热链球菌的增殖，最适添加浓度为0．5％和O．1％， 过量反而会抑制乳酸菌的增殖；柠檬酸二铵、乙酸钠和硫酸镁等无机盐也能促进 乳酸菌的增殖，最适添加浓度为O．2％，0．3％和0．05％，过量也会抑制乳酸菌的增 最为显著。通过响应面优化试验得出最适添加浓度为0．56％，0．54％和2．12％，菌 体密度达到1．223。同时研究了温度、初始pH、接种量对乳酸菌高密度培养的影 响。 STl)高密度培养条件，最适培养 优化嗜热链球菌(Streptoccusthermophilus 温度39C，最适初始pH7．7，最适接种量5％。优化后大大缩短了生长延滞期， 菌体密度达1．412。 在5L发酵罐中进行嗜热链球菌的增殖培养，6h菌体浓度达到最大，可达 到1．71。 (3)嗜热链球菌海藻酸微胶囊的最佳制备工艺为菌体：胶量=1：1，Span80 浓度为O．7％，乳化时间为15min，海藻酸钠浓度为1．5％，包埋率为75．6％。 壳聚糖／海藻酸微胶囊较海藻酸微胶囊提高了被包埋嗜热链球菌的存活率， 提高了65．74％；壳聚糖／海藻酸微胶囊在人工肠液中较海藻酸微胶囊难释放，释 放时间长，释放缓慢；壳聚糖覆盖后，微胶囊在胃液作用下有更高的胃酸耐受性； 同时耐胆汁酸性加强，在人工胃液中(pH=1．2)放置2h，活菌数仍能达到 壳聚糖／海藻酸微胶囊耐胃酸后仍有一定的发酵活力。放于冰箱中4C保存2 个月，菌体存活率仍然达到94．8％，根据国家对保健产品的要求，经计算该微胶 囊有效期为94．544天，延长了保藏时间。 综上所述，内源乳化凝胶法制备嗜热链球菌壳聚糖／海藻酸微胶囊是可行的， 能增强菌体对外界环境因素的抵抗能力，显著提高菌体在低温保存期和到达肠道 后的存活率，使乳酸菌更好地起到有益于健康的作用。微胶囊的粒径范围控制在 40--一609m，便于将微胶囊加入到饮料、食品等中去，为新型微生态制剂的开发 奠定了基础。 关键词：壳聚糖／海藻酸微胶囊；内源乳化凝胶化；嗜热链球菌；高密度培养； 存活率 Studi eson i onand i esof preparat propert mi I escontai ni Strepfoccus croencapsu ng naI EmuI Si f；cati on／inter I ati on by ge Abstract Theintestinalflora all roleinhuman mainfunctionof play