内生菌分离筛选其对甜菜促生增糖效应研究.pdf

内生茵分离筛选及其对甜菜促生增糖效应研究 摘 要 甜菜是世界制糖工业的主要原料之一，内生菌具有增强甜菜光合作用能力，提高其 抗逆性，延缓植株衰老，防治甜菜主要病害，可促进甜菜增产，改进品质等特点。因此， 利用甜菜内生菌筛选促生、防病、增产菌株的潜力巨大。内生菌对于提高甜菜栽培水平， 增强甜菜代谢的调控能力，以及对农业的可持续发展，都具有十分重要的意义。本论文 从甜菜内生菌中筛选出对甜菜具有促进生长、防治病害、增加产量的菌株，并利用表形 与16SrDNA分子特征进行鉴定，同时从激素水平、拮抗作用、营养元素吸收、光合作 用、氮糖代谢方面，研究了甜菜内生菌的增产机理。其结果如下： 采用选择性培养基，从来自新疆南北甜菜样品中分离到406株内生菌。对分离到的 rDNA 380株细菌和放线菌进行了菌落形态和培养特征观察、生理生化特性测定和16S 序列分析；对26株真菌进行了菌落形态、培养特征观察和ITS序列分析。结果显示甜 菜内生菌共分为12个类群，细菌7个属，放线菌2个属，真菌3个属。本研究所选择 的分离方法获得的内生菌，细菌占绝对优势。 通过种子发芽试验、麦芽鞘切断伸长测定，从甜菜内生菌筛选到3株甜菜促生菌株 PG-1(Bacillusflexus)、PG一2(Pseudomonas 素水平、溶磷能力、营养元素吸收、定殖等探索了促生机理，结果表明三株促生菌定殖 于甜菜，提高其激素水平与营养元素吸收。三株促生菌不同处理促进甜菜产量的增长， 其中菌株PG．3作用较好。PG一3处理后，与对照相比，甜菜体内四种植物激素(IAA、 个由进入一繁殖一稳定组成的内生菌与宿主和谐发展的过程。 通过甜菜病原菌分离鉴定，初步查明甜菜根腐病、褐斑病、立枯病、蛇眼病病原 菌分别为尖孢镰孢(Forsur solani)、甜菜生尾 oxysporum)、立枯丝核菌(Rhizoctonia beticola)、甜菜茎点霉(Phoma 孢(Cercospora betae)。通过平板对峙试验，筛选出 甜菜主要病害拮抗内生菌45株，其中菌株AT．1、AT．2和AT一3对甜菜主要病原菌抑菌 圈半径较大。定殖试验表明，3株拈抗内生菌能稳定定殖于甜菜根部。通过菌落形态、 培养特征、生化特性和16SrDNA序列分析，菌株AT．1鉴定为多粘芽孢杆菌 (Paenibacillus(EU56323 3))，AT一2为弯曲芽孢杆菌(Bacillus polymyxa llexus (EU594560))，AT．3为寡养单孢菌(Stenotrophomonas 病试验表明：3株拮抗内生菌对甜菜主要病害均有很好的防治效果。 研究了内生菌PG一1、PG．2、PG．3对甜菜叶片光合特性及产量形成的影响。结果表 明：、接种内生菌能显著促进甜菜光合作用，其中PG．3处理促进光合作用能力较强，其叶 实际光化学效率((pPS 1I)降低，而光化学猝灭系数(qe)、非光化学猝灭系数(釉) 升高。各处理尸n随着光照强度(PAR)的增加呈先升后降。生物学产量和含糖率分别提 高25．63％)币1117．46％。表明内生菌不仅影响甜菜光合参数，而且对于甜菜产量和品质的提 高具有明显的促进作用。 采用内生菌PG一1、PG．2、PG．3浸种、喷叶及灌根处理方法，调查其对甜菜栽培品 生菌对甜菜的含糖量有明显的提高作用，其中以PG．3灌根处理效果最好，其叶鲜重、叶 绿素含量、单根重、含糖率和产糖量的平均值分别提高了16．7％、55．3％、11．8％、22．1％ 和27．9％。在整个生育期，内生菌显著提高了氮糖代谢酶活性，其中NR和GS活力分别 呈双峰值和单峰值变化，而sS和GS活力呈单峰值变化，后期根部sS合成活力明显高于 分解方向活力，生育前期SPS活力高于后期。叶丛形成期达到最高值，说明NR、GS、 SS看HSPS活性的增强是甜菜含糖量升高的主要生理原因。 关键词：甜菜