辽宁省规模化养场pcv2感染流行病学调查及其研究.pdf

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2016-02-20 发布于贵州
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辽宁省规模化养场pcv2感染流行病学调查及其研究

f 目录㈣Y…2叭2㈣9帆5舢6洲5吣7 目录中文摘要…………………………………………………………………………………………I 英文摘要………．．：………………………………………………………………………………．V l弓I言…………………………………………………………………………………………………………………………l 1．1猪圆环病毒病研究进展…………………………………………………………………．．1 1．1．1病原学…………………………………………………………………………………l 1．1．2 PCV2致病机制………………………………………………………………………6 1．1．3 PCV流行病学………………………………………………………………………．．9 1．1．4 PCVD的诊断…………………………………………………………………………。11 1．1．5 PCV2疫苗研究进展………………………………………………………………。13 1．1．6PCVD I坊制…………………………………………………………………………………………………．．15 1．2本研究的目的与意义……………………………………………………………………15 2材料和方法…………………………………………………………………………………………………．17 2．1实验材料………………………………………………………………………………。l7 2．1．1j南毒……………………………………………………………………………………………………………17 2．1．2细胞和菌种……………………………………………………………………………。17 2．1．3主要生物制剂和化学试剂…………………………………………………………．17 2．1．4主要仪器设备………………………………………………………………………18 2．2实验方法…………………………………………………………………………………18 2．2．1PCV2 PCR检测方法的建立……………………………………………………………………．18 2．2．2 PCV2荧光定量PCR检测方法的建立………………………………………………20 2．2．3 PCV2环介导等温扩增(LAMP)检测方法的建立………………………………．．24 2．2．4实验设计……………………………………………………………………………27 2．2．5检测指标及方法………………………………………………………………………．29 2．3数据处理………………………………………………………………………………………36 3结果与分析………………………………………………………………………………………．．37 3．1PCV2 PCR检测方法的建立………………………………………………………………．37 3．1．1PCR体系及反应条件的优化………………………………………………………。37 3．1．2特异性试验…………………………………………………………………………。37 3．1．3敏感性试验……………………………………………………………………………37 3．1．4重复性试验…………………………………………………………………………38 3．2PCV2荧光定量PCR检测方法的建立…………………………………………………．．39 3．2．1目的片段的扩增、序列测定及其分析……………………………………………。39 3．2．2荧光定量PCR反应体系的优化……………………………………………………．．40 3．2．3特异性试验…………………………………………………………………………40 东北农业大学农学博士学位论文 3．2．4敏感性试验…………………………………………………………………………40 3．2．5标准曲线绘制………………………………………………………………………4l 3．2．6重复性检验………………………………………