重组h5n2亚禽流感病毒株的构建及其免疫原性的初步研究.pdfVIP

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2016-02-20 发布于贵州
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重组h5n2亚禽流感病毒株的构建及其免疫原性的初步研究.pdf

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重组h5n2亚禽流感病毒株的构建及其免疫原性的初步研究

IJIIIIII Iilll11111111111[111111111111111I| 目录 Y2295903 目录摘要…………………………………………………………………………………………………I 英文摘要…………………………………………………………………………………………一III 1前言…………………………………………………………………………………………………………………………l 1．1禽流感病毒概述……………………………………………………………………………．1 1．2禽流感流行情况……………………………………………………………………………．4 1．3禽流感疫苗研究进展………………………………………………………………………一8 1．4研究的目的意义……………………………………………………………………………10 2材料与方法……………………………………………………………………………………～11 2．1试验材料……………………………………………………………………………………11 2．1．1细胞株、毒种、菌种…………………………………………………………………．11 2．1．2病毒核酸物质…………………………………………………………………………11 2．1．3质粒的重排组合………………………………………………………………………．11 2．1．4 SPF鸡胚和SPF鸡……………………………………………………………………．11 1 2．1．5抗体制剂…………………………………………………………………………………………………………1 1 2．1．6试剂………………………………………………………………………………………………………………一1 2．1、7实验主要仪器设备……………………………………………………………………12 2．2试验方法……………………………………………………………………………………12 2．2．1大肠杆菌DH5a感受态细胞的制备…………………………………………………．12 2．2．2质粒的转化……………………………………………………………………………12 2．2．3重组质粒的克隆………………………………………………………………………．12 2．2．4去内毒素质粒的提取…………………………………………………………………13 2．2．5H5N1重组流感病毒的拯救……………………………………………………………13 2．2．7 H5N2重组病毒鉴定……………………………………………………………………14 2．2．8 7 H5N2重组病毒生物学特性……………………………………………………………1 2．2．9H5N2／PR8．5B1 7 9疫苗的制备…………………………………………………………．1 2．2．10 H5N2／PR8．5819疫苗免疫保护性实验………………………………………………18 ．．…．．．．．．．．…．…．．．．．．．．．．．．．．．．．…．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．…．．．．．．．…．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．…．．…．．．．．．．．．．．．．．．．．…．．．．．．．．．．．．．．．．18 3结果与分析……………………………………………………………………………………。20 3．1重组质粒的鉴定…………………………………………………………………