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重组大肠杆菌不热肠毒素ⅱ型蛋白部分生物活性研究
目 录
摘要…………………………………………………………………………………………………………I
英文摘要…………………………………………………………………………………………………III
1引言……………………………………………………………………………………………………1
1．1犊牛腹泻的概述…………………………………………………………………………………．1
1．1．1细菌性腹泻…………………………………………………………………………………．．1
1．1．2病毒性腹泻…………………………………………………………………………………．．2
1．1．3寄生虫性腹泻………………………………………………………………………………．．2
1．2犊牛大肠杆菌性腹泻……………………………………………………………………………．2
1．2．1病原学…………………………………………………………………………………………2
1．2．2流行病学……………………………………………………………………………………3
1．2．3临床症状及病理变化………………………………………………………………………．3
1．2．4诊断方法……………………………………………………………………………………．．4
1．3致犊牛腹泻性大肠杆菌主要致病因子…………………………………………………………4
1．3．1黏附素…………………………………………………………………………………………4
1．3．2肠毒素…………………………………………………………………………………………5
1．3．3志贺毒素………………………………………………………………………………………9
1．4大肠杆菌性犊牛腹泻病的预防…………．…………………………………。…………………．9
1．4．1药物防治……………………………………………………………………………………．．9
1．4．2疫苗免疫……………………………………………………………………………………lO
1．4．3卵黄抗体治疗………………………………………………………………………………ll
1。5研究目的与意义…………………………………………………………………………………12
2材料和方法……………………………………………………………………………………………13
2．1实验材料…………………………………………………………………………………………l3
2．1．1菌株、载体、实验动物及细胞系…………………………………………………………13
2．1．2主要试剂……………………………………………………………………………………13
2．1．3主要仪器设备………………………………………………………………………………13
2．2实验方法…………………………………………………………………………………………14
2．2．1细菌的分离、鉴定及序列分析…………………………………………………………一14
2．2．2重组蛋白的表达与鉴定……………………………………………………………………15
2．2．3rLT-IIcI重组蛋白的纯化及生物活性检测……………………………………………一17
2．2．4LT-II诱导小鼠机体免疫的研究………………………………………………鼻…………18
2．2．5卵黄抗体的制备……………………………………………………………………………20
3结果与分析……………………………………………………………………………………………22
3．1大肠杆菌的分离、鉴定及序列分析…………………………………………………………．22
3．1．1大肠杆菌的分离培养………………………………………………………………………22
万方数据
东北农业大学农学硕士学位论文
3．1，2革兰氏染色镜检……………………………………………………………………………22
3．1．3生化鉴定……………………………………………………………………………………22
3．1．4LT-II鉴定引物扩增结果…………………………………………………………………．22
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