重组金黄色葡萄菌次黄嘌呤单核苷酸脱氢酶与脂蛋白(a)的相互作用.pdfVIP

摘 要 金黄色葡萄球菌(S. aureus)表面的纤溶酶原受体能够与宿主纤溶酶原(Plg)结合, 此外, 与病菌结合的Plg可以在宿主或病菌的Plg激活剂的作用下转变为纤溶酶(Pm), 从而协助S. aureus穿越宿主组织屏障, 达到深层入侵的目的。 次黄嘌呤单核苷酸脱氢酶(IMPDH)是S. aureus表面的纤溶酶原(Plg)受体之一, 它 可以与Plg 的赖氨酸结合位点(LBS)相结合。脂蛋白(a) 中的载脂蛋白(a)[Apo(a)]与Plg 有很高的同源性, 且两者的Kringle 结构域都含有LBS, 其中Apo(a) 的KIV10含有高亲 和力的LBS 。因此本实验提出了Lp(a)可以与S. aureus表面的Plg受体相结合, 进而可能 竞争性抑制S. aureus与Plg结合的假说, 目前已经证明了Lp(a)可以与S. aureus表面的 Plg受体之一α-烯醇化酶(α-enolase)相结合。 本研究对S. aureus表面的另外一种Plg受体IMPDH与Lp(a) 的相互作用进行了研究, 首先克隆了S. aureus CMCC26003 的IMPDH 基因, 酶切后将其连接到表达载体 pASK-IBA37 中, 并在大肠杆菌BL−21 中表达了该重组蛋白(rIMPDH) 。通过酶联免疫 吸附试验(ELISA)、亲和色谱层析及Western blot对rIMPDH与Lp(a) 的相互作用机制进 行了研究。结果表明rIMPDH可以与Lp(a)和重组KIV10(rKIV10) 的LBS发生特异性结合, 而且一定浓度的赖氨酸类似物6-氨基己酸(EACA)可以抑制这种结合, 表明Apo(a) 中 的LBS参与了相互作用, 然而本研究并未发现Lp(a)或rKIV10对rIMPDH与Plg 的相互作 用有明显的抑制。 关键词：金黄色葡萄球菌；纤溶酶原；次黄嘌呤单核苷酸脱氢酶；赖氨酸结合位点； 脂蛋白(a) The Interaction Between Lipoprotein(a) and Recombinant Inosine 5-monophosphate Dehydrogenase derived from Staphylococcus aureus Abstract Plasminogen receptors on the surface of Staphylococcus aureu (S. aureus) can bind to Plasminogen (Plg), in addition, Plg can be converted to plasmin (Pm) by Plg activators. The surface-associated Pm enhance S. aureus to spread across the host tissue barrier. Inosine 5-monophosphate dehydrogenase (IMPDH), which is one of Plg receptors on the surface of S. aureus, can bind to lysine binding sites (LBS) in plasminogen. Apolipoprotein(a) [Apo(a)], which is one component of Lipoprotein(a) [Lp(a)], has a high homology with Plg and both of them contain LBS in their Kringle (K) domains. The high affinity LBS was identified in KIV10 of Apo(a). Therefore,