重组犬ifn-在hek293t细胞中的表达及犬ifn-γ腺病毒载体的构建.pdfVIP

摘要 原以及抗原特异性刺激T淋巴细胞克隆也可产生。它除了具有抗病毒、抗肿瘤活性 I类和II类分子的 外，还起着重要的免疫调节作用，如活化巨噬细胞、提高MHC 表达、促进抗原提呈，诱导Thl细胞的分化等，在机体对肿瘤及多种胞内病原感染 的免疫控制和免疫病理中起着重要的作用。由于IFN-Y对机体免疫系统具有极大的 调节作用，是机体发挥免疫功能，清除体内病原体不可缺少的成分。因此IFN．丫既 可以作为药剂用于感染性疾病或肿瘤等的治疗，又可以作为免疫佐剂，增强疫苗的 免疫效果。 为了建立一套犬IFN-7(canine 大肠杆菌DH5a感受态细胞，经过酶切鉴定筛选出阳性克隆，测序鉴定。构建的真核 且表达产物能够分泌到细胞外。犬IFN-3,重组表达质粒的成功构建与真核表达，为以 后进行犬IFN吖活性分析和生物学功能的研究奠定了基础。 本研究在犬IFN吖基因进行真核细胞表达的基础上，构建了犬IFN-Y基因的重组腺 I双酶切获得包含终止密码子的CalFN-1,片段，重组到穿梭质粒 上通渤I和Apa I和 1-Ceu I双酶切重组穿梭质粒，获得含有CMVoCaIFN-3,的表达盒，与线性化的腺病毒 Viral 骨架质粒Ade]no．XDNA连接，经Swa I 现细胞病变效应后收集细胞，．20℃一37℃反复冻融细胞3次得到含重组病毒的病毒液， 这为以后进行犬病毒病的基因治疗等研究奠定了一定基础 关键词：犬；干扰素．y；HEK293T细胞；表达；腺病毒载体；构建 in Cellsand ofRecombinantCanineGeneHEK293T Expression IFN-7 Vector ConstructionofCanineRecombinantAdenovirus IFN-7 Student：Jin Fei Graduate HuidtmAdvisor：．Prof．Zhong Medicine Major：．BasicVeterinary Abstract TcellsandNK by cells， Interferon-gamma(IFN-3)，characteristicallyproduced or activatedTcellcloneCanalsosecret a critical IFN吖．It very antigen plays mitogen to and activities． roleinresistanceviruses．anti．tumor immunomodulat