预分化脂肪干细胞纤维蛋白胶和磷酸钙骨水泥自体异位构建血管化移植物.docVIP

预分化脂肪干细胞与纤维蛋白胶和磷酸钙骨水泥自体异位构建血管化移植物**☆ 杨 佩1，黄 欣2，王春生1，王坤正1 (1西安交通大学医学部第二附属医院骨一科，陕西省西安市 710004；2西安交通大学医学部第一附属医院心血管内科，陕西省西安市 710061) 文章亮点： 实验的创新在于选取脂肪干细胞为靶点，进行体外定向诱导分化成为血管内皮细胞，经体外鉴定活性后，进行体内成血管实验；利用快速成型技术制备确定外形和可控内部孔道的三维多孔磷酸钙骨水泥支架，并通过低温负压吸附的方法构建基于血管内皮细胞方向预分化的脂肪干细胞、纤维蛋白胶/多孔磷酸钙骨水泥支架的骨组织工程复合体，进而检测该复合体的体内促血管生成特性，同时检验其降解特性。 关键词： 生物材料；组织工程骨材料；脂肪干细胞；组织工程，血管化；支架；预构；纤维蛋白胶；多孔磷酸钙骨水泥；国家自然科学基金 主题词： 生物相容性材料；干细胞；纤维蛋白组织粘着剂；磷酸钙类 基金资助： 国家自然科学基金资助项目*；陕西省自然科学基金(2010JQ4009) * 摘要 背景：预构骨皮瓣研究启发人们构建预构血管化骨进行游离移植来替代带血管蒂游离自体骨移植修复大段骨缺损的想法。 目的：设计一种基于预分化脂肪干细胞、纤维蛋白胶和多孔磷酸钙骨水泥支架复合体的血管化移植物。 方法：将体外分离培养的大鼠脂肪干细胞在条件培养基中进行血管内皮细胞定向分化，经鉴定活性后，复合至纤维蛋白胶和多孔磷酸钙骨水泥构建血管化组织工程支架。将血管化组织工程支架、纤维蛋白胶/多孔磷酸钙骨水泥支架及多孔磷酸钙骨水泥支架分别植入SD大鼠股四头肌肌袋内，植入后2，4周进行组织学检测、血管定量分析和Western blot检测。 结果与结论：向血管内皮细胞分化的脂肪干细胞与纤维蛋白胶和多孔磷酸钙骨水泥共培养7 d，可见细胞密度适中，与支架组织结合较好。植入实验中，各组支架孔隙中充填有纤维血管组织和脂肪组织，血管化组织工程组支架孔隙中均长入大量血管，并有小动脉长入，不同时间点的血管直径和数量及血管内皮生长因子C的表达量均优于纤维蛋白胶/多孔磷酸钙骨水泥组和多孔磷酸钙骨水泥组(P 0.01)。表明构建的血管化组织工程支架能够实现可靠迅速血管化。 Prefabrication of vascularized grafts based on pre-differentiated adipose derived stem cells, fibrin sealant and porous calcium phosphate cement scaffold Yang Pei1, Huang Xin2, Wang Chun-sheng1, Wang Kun-zheng1 (1Department of Orthopaedics, Second Affiliated Hospital of Medical College of Xi’an Jiaotong University, Xi’an 710004, Shaanxi Province, China; 2Department of Cardiology, First Affiliated Hospital of Medical College of Xi’an Jiaotong University, Xi’an 710061, Shaanxi Province, China) Abstract BACKGROUND: Construction of vascularized bone substitutes to mimic free vascularized fibular grafting in treating large bone defects still remains challenges to researchers during the past years. OBJECTIVE: To design and construct a new vascularized tissue-engineered bone graft using pre-differentiated adipose derived stem cells, fibrin sealant and porous calcium phosphate cement scaffold. METHODS: Adipose derived stem cells isolated from rats were directly differentiated to endothelial cells and then incorporated in fibrin sealant