多拷贝木聚糖基xyn-t的枯草芽胞杆菌整合表达载体的构建及其表达.pdfVIP

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2016-02-28 发布于贵州
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多拷贝木聚糖基xyn-t的枯草芽胞杆菌整合表达载体的构建及其表达

万方数据 AnhuiAgriculturalUniversity AnhuiAgriculturalUniversity AAnnhhuuiiAAggrriiccuullttuurraallUUnniivveerrssiittyy MasterDegreeThesis MasterDegreeThesis MMaasstteerrDDeeggrreeeeTThheessiiss ConstructionandExpressionofRecombinantExpressionVector ConstructionandExpressionofRecombinantExpressionVector CCoonnssttrruuccttiioonnaannddEExxpprreessssiioonnooffRReeccoommbbiinnaannttEExxpprreessssiioonnVVeeccttoorr forMulti-copyxynGeneinBacillussubtilis forMulti-copyxynGeneinBacillussubtilis ffoorrMMuullttii--ccooppyyxxyynnGGeenneeiinnBBaacciilllluussssuubbttiilliiss Postgraduatecandidate LiXiaodong ： Academicsupervisor Prof.ZhouMing ： AnimalScienceandTechnologyCollege AnhuiAgricultural ， University Hefei 230036 ，， Hefei Anhui China ，， June 2014 ，万方数据中文摘要我国作为一个养殖大国，饲料总产量位居世界第一。然而我国的特殊国情所致，其饲料资源相对匮乏，利用生物技术提高常规饲料的利用率，并且开发一些非常规性饲料用于拓宽饲料资源，将是极为重要的。近年来，内切木聚糖酶已多被广泛应用于饲料、制浆造纸和食品工业等，本研究基于木聚糖酶的重要价值和开发前景的广阔性，成功地转化了多拷贝木聚糖酶基因的枯草芽孢杆菌WB800N 表达宿主，采用固体发酵的形式，外分泌出了内切木聚糖酶，并且对该酶进行了初步的酶学性质分析。整合载体pHT43/Spo0A是本试验需要构建的目的载体，是以pHT43 质粒为基础，以Spo0A基因作为单交换的同源片段，利用限制性内切酶位点KpnI插入，得到整合载体pHT43/Spo0A。研究发现，为了减少过载的外源高拷贝木聚糖酶基因对宿主的生长代谢的影响，人工将xynT基因内的碳水化合物结合区敲除，经过亚克隆，成功构建单拷贝载体