小麦抗白粉病产过敏性反应机理的初步研究.pdf

摘 要 小麦扬158接种白粉菌菌株Qiul表现过敏性坏死反应，接种白粉菌菌株Bai3 表现亲和感病反应。本研究从这两组合入手，探讨小麦抗白粉菌产生过敏性坏死反 应的机理，解析活性氧物质在过敏性反应中所起的作用。 小麦与白粉菌互作的组织学观察结果表明：白粉菌菌株Qiul、Bai3接种到小麦 品种扬158上6h、12h、24h后，各反应型分生孢子的发育情况差异不大。接种6h 后，白粉菌分生孢子一端形成初生芽管，接种12h后，分生孢子的另一端可形成附 着胞芽管，接种24h后，附着胞芽管继续发育形成附着胞，附着胞可诱导小麦细胞 形成乳突。在亲和性组合扬158／Bai3中，接种48h后，白粉菌附着胞沿寄主表皮方 向长出初生菌丝，分生孢子进一步发展形成吸器，接种72h后，初生菌丝进一步扩 展形成次生菌丝，从而形成具有次生吸器的菌落，接种96h后，次生菌丝进一步扩 展，形成许多次生吸器。在非亲和性组合扬158／Qiul中，接种48h后，可观察Nd, 麦组织内形成过敏性细胞，接种96h后，接种点邻近的小麦细胞也产生过敏性反应。 通过荧光显微镜和用DAB染色方法可以观察到过敏性坏死细胞。H：0，可以诱导亲 和性组合中过敏性细胞数量的增加，而活性氧清除剂抗坏血酸、谷胱苷肽、过氧化 氢酶等处理非亲和性组合后，抗性叶片中过敏性细胞的数量显著减少．因此H。0。与小 麦对白粉菌过敏性反应相关。用壳索孢菌素处理处理亲和性组合，过敏性细胞数量 显著增加，证实质子泵的激活也和过敏性反应相关。 为了找出与小麦抗白粉菌产生过敏性坏死反应相关的基因，采用cDNA—AFLP差 异显示的方法对抗感组合进行了筛选。共筛选到了200多个在抗性叶片中特异性表 知功能蛋白有一定同源性，对其中9个cDNA片段进行RT—PCR验证，结果表明：在 接种后24小时，和编码铜／锌超氧化物歧化酶伴侣蛋白、胰岛素降解酶、胆汁酸B 一葡聚糖酶、以及编码1，5一二磷酸核酮糖羧化酶／加氧酶的大亚基、一种PHD指蛋 白等基因有较高同源性的片段在抗性叶片中特异性表达，在对照和感病叶片中不表 Cu-ATPase的基因有较高同源性的片段在三个材料 达。和编码MLA家族蛋白、CopF 中均表达，但是在抗性叶片中的表达明显强于对照和感病叶片。而和编码hAT转座 子家族二聚体、叶绿体膜蛋白基因有较高相似性的基因片段在三种材料中均表达， 呈假阳性的结果。 关键词： 小麦白粉菌过敏性反虑活性氧cDNA—AFLP Abstract The cultivarofwheat 158js withHR．resistanceto mildew yang responds powdery jsolate Qiuland withjsolateBai3．TheaimofthisresearchiStounderstand compatible the mechanismofresistanceto mildewinwheatandto theroleof powdery analyze reactive in onthe resistancebased combination． oxygenspeciesplant The studies histochemiealrevealedthat：the ofcondiumiUdifferent development interaction at weresimilar6h，12h，24hafterinoculation．the tubesof types primarygerm fromthe otherof f