虾夷扇贝(painopecten yessoensis)活品运输中菌群结构的变化.pdf

Thesis for the Degree of Master Investigation of intestinal bacterial community along live supply chain of bottom cultured scallop Pationopecten yessoensis Dissertation Submitted to Dalian Ocean University Dissertation Supervisor: Professor LI Jun-rong Master Candidate: Liushiyong 摘要 摘要 以活品虾夷扇贝（Pationopecten yessoensis ）供应链为研究对象，先后进行了活品供 应链案例实地调查以及流通链模拟研究，重点跟踪分析了沿活品链的扇贝肠道菌群结构变 化规律；同时，还对虾夷扇贝肠道菌群结构与生长环境（海水及沉积物）之间的关系进行 了探索，为基于微生物的虾夷扇贝活品流通链卫生监控及产地溯源提供参考。 首先，对活品底播虾夷扇贝的流通链做了全链实地调查，从原料生长、采捕、海上活 品运输、陆基净化直至出库进行了系统全面地跟踪，了解了现有虾夷扇贝流通链运营模式， 经过逐个环节分析找出其关键点及现存问题。最后，确定了采捕、海上活湿运输、靠岸中 转及净化等为关键环节；此外，净化后的销售物流环节主要有湿运及干运两种模式。另外， 针对现有销售终端的活品虾夷扇贝卫生情况进行了初步调查，对市售活品虾夷扇贝进行了 细菌总数分析，结果表明，市售虾夷扇贝各个组织中细菌菌落总数浓度顺序为：肠道＞内 脏＞性腺＞外套膜＞贝柱。 其次，对活品流通链案例进行实地逐环节地跟踪取样，研究扇贝肠道菌群结构与其 生长环境的关联，及其捕后沿流通链的变化规律。取样点包括采捕、海上活湿运输、陆基 中转、净化I、净化II 及市场终端；采取的样品为活品虾夷扇贝、生长环境之海水及沉积 物。结果表明：①根据DGGE 指纹图谱，海水、沉积物和肠道菌群分别获得了20 、18 和 12 个条带，其中有9 个共有条带，扇贝肠道菌群结构与生长环境之间具有较强的相关性， 这为底播虾夷扇贝以及其它海产品的原产地溯源提供新思路；②此外，流通链主要环节的 DGGE 图谱分析结果发现，在采捕、活湿运输、中转、净化I、净化II 及市场等六个环节 条带数分别为 12、14、16、13、9、22 个，由此表明捕后处置环节导致菌群数量增多， 在随后的净化环节菌群数目明显下降；③戴斯系数分析表明，从采捕、海上活湿运输、陆 基中转、净化I、净化II 到市场终端 ，相邻环节的相似性分别是64%、73.3%、69.0%、 63.6%、32.3% ；④细菌总数分析结果表明，活品底播虾夷扇贝体内细菌总数在采捕、活 湿运输、中转、净化Ⅰ和市场等流通环节的菌落总数对数值分别为3.40、5.22、5.43、4.54 和5.53 。在整个流通环节的变化程度不大，说明该虾夷扇贝活品链能够有效控制细菌总数； ⑤在流通过程中，粪大肠菌群的累积速率大于大肠菌群的累积速率，在净化环节，粪大肠 菌群的净化速率大于大肠菌群的净化速率，说明环境条件对活品贝类卫生状况影响极大。 最后，通过案例调查的结果，建立了干湿两种模拟流通链，分别为4 天模拟净化加3 I 摘要 天模拟湿运，以及4 天模拟净化加3 天模拟干运。研究在模拟流通链下虾夷扇贝各组织（全 贝、体腔液、肠道、内脏团、闭壳肌、性腺、裙边和鳃）的细菌总数、大肠菌群和弧菌总 数变化。结果表明，①净化环节活品虾夷扇贝组织（内脏、性腺、肠道和鳃）细菌总数均 出现明显的先上升后下降趋势，说明模拟流通的初期对贝类细菌总数有一定影响；②运输 环节细菌组织（内脏、性腺、肠道和鳃）呈上升趋势，干运比湿运的含量高；③模拟流通 虾夷扇贝主要组织大肠菌群呈现出下降的趋势，说明模拟净化对活品虾夷扇贝大肠菌群具 有净化作用；④干运环节大肠菌群含量略高于湿运；⑤就弧菌而言，