西瓜材料亲缘关及分类的rapd分析.pdf

摘要 本试验以四川农业大学保存的西瓜种质资源为材料(共42个材料)。通过田问、 室内的调查进行西瓜的生物学性状的统计分析；采用改良CTAB法对西瓜属基因组 DNA进行提取；对西瓜的RAPD反应体系进行了优化；筛选适用于本试验的随机引 物；计算材料间的遗传距离并对材料进行聚类分析．结果如下： 1、通过田间和室内对42个西瓜材料的生物学性状进行观察统计。结果表明 这些材料在倒蔓期、开花期、坐果节位、结果数、病虫害、果型，果重、果皮硬 度、果皮颜色、果肉色、果皮厚、皮肉界限、种子大小多少颜色、TSS等方面均 存在一定的差异。 2、本研究使用的改良cTAB法完全适用于西瓜属基因组DNA的提取，提取的 DNA RAPD的分析． 3、采用正交试验设计的方法，建立了西瓜RAPD分析的优化反应体系。所 Buffer 得最优体系为： 25}L的反应体系中含有Taq25ret001．／L，MgCL,1．5 mmol／L，dNTP250Pmol／L，TaqEnzyme 适宜的扩增条件为94。C预变性5 Imin，40个循环后，在72℃保持7分钟。 4、从59个随机引物中筛选出9个多态性好的随机引物，用这9个引物对42 个西瓜材料进行扩增，9个引物共扩增出792条DNA扩增带，平均每个引物lO．2 条，其中76条具有多态性，占总条带数的82．6％，每个引物可扩增出5一16条多 态性带，平均每个引物8．4条多态性带。 Distance 计算材料问遗传距离。得出42个西瓜材料的遗传距离为0．0655—0．5081；用 UPGMA进行聚类，当相似系数为0．19时，可以将42份材料分为8大类群；1个俄罗 斯生态地理型，1个日本生态地理型，1个美国生态地理型，1个华南生态地理型， 1个西北生态地理型，3个中间型，与传统的西瓜生态型分类基本吻合． 关键词：西瓜 RAPD聚类分析亲缘关系遗传多样性 Abstract Inthis of42watermelonmaterialsfromSichuan study，thegeneticdiversity wt，re thecovarianeeofthe form AgriculturalUniversitystudied,Pass analysisbiology thattheinthe carriesonthe the field,indoor inquisition watermelon；Adoption CTABmethodtoextractwatermelon DNA：Establishedthe improvement genomic RAPD-PCRin is to optimal systemwatermelon；11le sievingapplicable experiment the distancebetweenmaterialsandcombinesto originallyofprimer；Computegenetic to on an thematerial．11忙resultsas carry gatheringanalysis