核酶介导的suvivin基因表达抑制在肿瘤基因治疗中的应用.pdf

Survivin特异性核酶的研究 中文摘要 中文摘要 Survivin基因是抗凋亡IAP(inhibitor ofapoptosis)基因家族的新成员，在大多 数人类肿瘤组织中表达水平异常增高，但是在正常的成人组织中表达水平很低。因 此，这种肿瘤表达特异性以及促有丝分裂的功能使得Survivin基因成为了肿瘤基因 治疗研究的一个新靶点。 为了降低Survivin基因的表达水平，我们特异性地针对SurvivinmRNA的编 码区设计了5个锤头状核酶。以下两种实验方法被用来检测各个核酶的体外切割活 性和效率：a．引物延伸法确定各个核酶在Survivin 异性切割SurvivinRNA，然而切割的效率有所不同。 为了研究Survivin特异性核酶对肿瘤细胞的作用，我们分别利用复制缺陷型 III启动子的核酶序列导入人肝癌细胞 的逆转录病毒和腺病毒载体将带有polymerase 亡的发生(Western检测PARP