河北省流行性出热病毒的rt-pcr分型研究.pdfVIP

河北省流行性出血热病毒的RT—PGR分型研究 中文摘要 ．目的：我国是世界上受流行性出血热病毒(又称汉坦病 毒)危害最为严重的国家。为了弄清河北省流行性出血热 (E／IF)鼠间疫情情况和病毒基因型别，指导疫苗应用和诊断 试剂的制备，以及临床上流行性出血热的诊治，本研究对河北 省EHF疫区(保定、沧州)的阳性鼠肺直接进行RT—PCR分 型。 方法：用夹夜法从河北省代表性疫区捕鼠，计算鼠密度， 制备鼠肺冰冻切片；经间接免疫荧光法(IFAT)筛选阳性鼠 肺，计算鼠带毒率；用阳性鼠肺标本直接做RT—PCR基因分 型。研究中首先设计了两对对汉坦病毒部分M基因组片段进行 扩增的引物，这两对引物配合使用，用于套式PCR扩增。这对 引物对汉坦病毒具有广泛的适用性。PCR扩增产物进行琼脂糖 凝胶电泳，并通过紫外线检测仪观察扩增情况。 结果：1999年-2000年，在保定和沧州两地进行鼠密度及 鼠带毒率调查：宅区鼠密度为6．11％、鼠带毒率为28．02％；野 外鼠密度为3．8％、鼠带毒率为19．56％，且带毒的优势鼠种为 褐家鼠。保定、沧州两地宿主动物带毒率略有差异。对阳性鼠 肺直接进行RT-PCR分型结果表明：河北省流行的汉坦病毒主 要为SEO型(家鼠型)，与以往