淡色库蚊cyp家族新成员基因克隆、序列分析、表达与初步鉴定.pdfVIP

摘 要 媒介昆虫对杀虫剂的抗性是虫媒病控制中一个亟待解决的突出问题，媒 介抗性治理有赖于抗性机制的理解。研究表明，抗性产生是由基因决定的。 就目前广泛使用的菊酯类杀虫剂，其抗性机制主要涉及代谢酶类如细胞色 素P450(CYP450)等。 本研究根据昆虫细胞色素P45 0氨基酸保守序列设计简并引物，在选育 淡色库蚊对溴氰菊酯抗性品系的基础上，运用RT-PCR方法从淡色库蚊对溴 检测其在抗性和敏感品系中的差异表达；通过基因重组方法，构建原核表 达载体，进行原核表达和鉴定。初步探讨了CYP4基因的诱导表达和鉴定， 为后续研究CYP4基因在淡色库蚊抗性中的作用、媒介抗性的分子机理和特 异性抗体开发奠定基础。 1．淡色库蚊CYP4家族新成员基因克隆及序列分析 根据GenBank中的昆虫P45 0氨基酸保守序列和Scott等报告的P450 引物设计1对简并引物，运用RT—PCR方法从淡色库蚊对溴氰菊酯抗性品系 四龄幼虫RNA中扩增P4