结核分支杆菌a85a、ag85b dna疫苗的构建、免疫原性及其保护效力的研究.pdfVIP

摘 要 目的：构建结核分支杆菌分泌蛋白A985A、A985B编码基因的DNA疫苗， 研究这两种DNA疫苗的免疫原性和保护效力。 试剂盒大量纯化无内毒素的质粒DNA。将C57BL／6小鼠随机分为5组，每组10 DNA 疫苗(E)通过肌肉注射的方法免疫小鼠，每3周免疫1次，共免疫3次；卡介苗 (C)组每只小鼠腹部皮内注射，只免疫一次。通过ELISA方法检测血清中抗 核分支杆菌H37Rv攻击，观察小鼠体重变化，攻击4周后检测细胞因子IFN．Y、 IL一12，进行肺组织病理检查及菌落计数等。 DNA经PCR扩增分别可见 结果：重组质粒A985A-pVAXI和A985B—pVAXl I和BamH 1041bpA985A和978bpA985B特异性片段：经限制性内切酶Nhe I消 DNA疫苗免疫的小鼠特异性抗体lgG 和A985BDNA疫苗。经A98