聚合酶链反应在本血吸虫病家兔感染早期检测及疗效考核中的应用研究.pdfVIP

聚合酶链反应在日本血吸虫病家兔感染早期检测及疗效考骸中的应用研究 中文提要 聚合酶链反应在日本血吸虫病家免感染早期 检测及疗效考核中的应用研究 中文提要 本研究拟探索核酸检测技术在日本血吸虫感染早期检测及疗效考 核中的应用。根据日本血吸虫基因设计特异性引物，采用PCR技术对 日本血吸虫感染宿主的不同标本和不同种虫(日本血吸虫和曼氏血吸 虫)的DNA模板进行扩增，以测定PCR的特异性，并倍比稀释虫卵和 粪便的模板DNA进行扩增，以测定PCR的敏感性。应用PCR检测方 法对不同感染度和不同感染期家兔血清以及感染家兔治疗前后的血清 进行检测。并与免疫学方法ELISA和COPT比较，以寻找早期诊断和评 价疗效的新方法。结果，从日本血吸虫的成虫、虫卵、日本血吸虫感染 家兔的肝组织、粪便和外周血清中均扩增到分子量为230bp的特异性阳 性条带，尤其是能在感染早期(感染后1w)即可扩增出阳性条带，比 粪检法和免疫学方法早3w一6w。PCR扩增产物经测序并在基因库中匹配， 证实为日本血吸虫基因中的一个片段，其同源性为98％，且与曼氏血吸 虫无交叉反应。其PCR扩增敏感性检测结果表明，0．02