microrn在hpv16(+)宫颈鳞癌组织中的异常表达及其临床意义.pdfVIP

·中文论著摘要· 及其临床意义 目的 的miRNA基因谱，选取兴趣基因，进行分析，初步探讨基因异常表达的临床意 义 材料与方法 一、材料 实验组3例：选择收集2009年9月到2010年10月中国医科大学附属盛京医 院妇产科确诊为宫颈鳞癌Ib期(HPVl6+)并行手术治疗的患者共3例，手术方 式为经腹广泛性全子宫切除术+盆腔淋巴结清扫。对照组3例：选取实验组患者宫 颈正常切缘组织。 二、主要试剂 Array Array洗涤液试 光度仪，GenePix4000B芯片扫描仪 三、方法 基因芯片技术 Eppendorf管中液氮保存，从液氮 将约50—100mg新鲜样本组织块放入1．5ml Trizol 测定RNA在分光光度计260nm、280rlnl、230hal的吸收值，以计算浓度并评估 纯度。用甲醛电泳试剂进行变性琼脂糖凝胶电泳，检测RNA纯度及完整性。用标 Power 记酶将Hy3TM或Hy5TM荧光集团标记合格的RNA(miRCURYTMArray 标记试剂盒，Exiqon公司)，具体芯片杂交标记及杂交由上海康成生物公司完成。 四、统计学分析 利用GenePix4000B芯片扫描仪扫描芯片的荧光强度，并将实验结果转换成 的分层聚类。利用ScatterPlot等软件对数据进行分析，得出具有统计学意义的差 预测差异miRNA的靶基因，进行GO、pathway分析。 耋口术结果 1、72个miRNA的表达差异具有统计学意义，其中68个表达上调，4个表达下 调 后续GO、pathway分析。 耋口结呱-I；1二 相关，其异常表达在疾病发展中起重要角色，对疾病的诊治及预后起关键作用。 关键词 宫颈鳞癌，人乳头瘤病毒，microRNA，基因芯片技术 2 ·英文论著摘要· Abnormal andClinical expression significances in ofMicroRNAsHPVl 6(+)cervical l- ● cell SauamousCarClnoma ective obj UseMicroRNA HPVl genechip technology(rnicroarray)，screening6(+)cervical cellcarcinomato squarnous tissuesfindAbnormalmiRNA and expressionspectrum thenselectthe functional