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MiR-378 对肝癌细胞侵袭迁移的影响及其机制 中文摘要 MiR-378 对肝癌细胞侵袭迁移的影响及其机制 中文摘要 背景和目的 微小RNA (microRNAs, miRNAs)是一类长约22 个核苷酸的非编码小分子RNA ， 通过抑制靶mRNA 的翻译或降解靶mRNA 负性调节基因的表达，从而参与生命过程 中一系列的重要进程，包括生长发育、新陈代谢、细胞增殖、分化及肿瘤形成。我们 课题组前期研究结果显示肝癌患者血清 miR-378 水平较健康人低；过表达 miR-378 抑制肝癌细胞株的生长增殖和克隆形成，其作用是通过靶向 IGF1R 而发挥。本课题 拟在此基础上进一步探讨miR-378 对肝癌细胞侵袭迁移的影响并阐明其作用机制。 方法 1、用脂质体介导的转染方法将miR-378 模拟物(miR-378 mimics)及miR-378 阻遏 物(miR-378 inhibitors)分别转染肝癌细胞株hepG2 及hepG2.2.15 ，并分别设置模拟物 阴性对照 （negative control ， NC) 和阻遏物阴性对照 （inhibitor negative control ， inhibitor NC) 。通过Transwell 侵袭实验检测细胞侵袭能力；采用Transwell 迁移实验 及划痕实验检测细胞迁移能力。 2 、构建过表达IGF1R 的质粒载体，与miR-378mimics 共转染肝癌细胞株hepG2 及hepG2.2.15 ，并设置IGF1R 的空载体(control vector group，CON)与miR-378mimics 共转染为对照组，观察miR-378 对肝癌细胞侵袭迁移的影响是否通过IGF1R 发挥。 结果 1、Transwell 侵袭及迁移实验结果显示：与对照组比较，（1）转染miR-378 mimics 72h 后，hepG2 及hepG2.2.15 细胞侵袭和迁移能力均显著降低，平均每高倍视野(×200) 侵出小室的细胞数与NC 组相比均显著减少，hepG2 细胞miR-378 mimics 组分别为 NC 组的0.486 倍和0.459 倍 (P0.01) ；hepG2.2.15 细胞miR-378 mimics 组分别为NC 组的0.582 倍和0.566 倍 (P0.01)。（2 ）转染miR-378 inhibitors 72h 后，hepG2 及 hepG2.2.15 细胞侵袭和迁移能力与inhibitor NC 组相比均无显著差异(均 P0.05) 。 2 、划痕实验显示hepG2 及hepG2.2.15 细胞划痕后，miR-378 mimics 组划痕愈合 I 中文摘要 MiR-378 对肝癌细胞侵袭迁移的影响及其机制 速度明显慢于NC 组(均 P0.01) 。 3、共转染IGF1R 及miR-378mimics 后，与共转染CON 及miR-378mimics 相比， hepG2 及hepG2.2.15 细胞侵袭和迁移能力均显著增强 （均 P0.01 ）。 结论 1、MiR-378 抑制肝癌细胞侵袭迁移。 2 、MiR-378 通过靶向IGF1R 而发挥其对肝癌侵袭迁移的抑制作用。 关键词 肝癌；miR-378 ；IGF1R ；侵袭；迁移 作 者：戴桂萍 指导教师：李莉华 II Effects of miR-378 on Hepatocellular carcinoma Cell Invasion and Migration Potential