n-乙酰半胱氨可恢复tdp-25所致的运动神经元样细胞持续性钠通道功能异常.pdf

目 录 中文摘要…………………………………………………………………l 英文摘要…………………………………………………………………4 英文缩写………………………………………………………………．8 研究论文N．乙酰半胱氨酸可恢复TDP．25所致的运动神经元样细胞持续 性钠通道功能异常 前言…………………………………………………………………9 刖舌………………………………………………………………… 材料与方法…………………………………………………………11 结果…………………………………………………………………16 附图…………………………………………………………………20 讨论…………………………………………………………………26 结论…………………………………………………………………28 参考文献……………………………………………………………29 综述 持续性钠电流的相关研究………………………………．．34 致谓}………………………………………………………………………47 个人简历…………………………………………………………………48 万方数据 中文摘要 N．乙酰半胱氨酸可恢复TDP．25所致的运动神经元样细胞持续 性钠通道功能异常 摘 要 lateral 肌萎缩侧索硬化(amyotrophic 害上、下运动神经元的神经变性疾病。本病具有慢性、进行性、致死性的 特点。本病的大部分患者是散发型，约10％患者存在家族性常染色体显性 遗传史，即为家族型，20％的家族型患者存在铜／锌超氧化物岐化酶 (SODl)基因突变。目前研究发现，约3％的家族型患者以及2．9％散发型 TDP．43基因突变有着密切的关系。 常表现为高度磷酸化、泛素化、易裂解、移位到细胞质并聚集。这些特征 使TDP．43丧失了正常功能，相反具有毒性作用，诱导细胞凋亡以及运动神 经元轴突变短，髓鞘的脱失。目前发现突变的TDP．43会引起线粒体功能 末端被酶分解的片段之一。TDP一25可以促进TDP一43包涵体的形成，对运 动神经元具有更强的毒性作用。TDP．25引起线粒体功能紊乱以及加速氧 化损伤，运动神经元变性，在ALS的发病机制中发挥重要作用。 TDP．43可引起细胞的高兴奋性，兴奋性增高的神经元会导致异常动 作电位的爆发，引起细胞内钙超载，产生兴奋性毒性。目前研究发现 TDP一43的表达会引起细胞线粒体功能障碍，能量不足，加重氧化损伤。 主要表现为活性氧自由基(reactiveoxygen 持正常的清除作用。大量的活性氧聚集使得线粒体膜电位异常以及呼吸链 损伤，引起能量依赖性离子通道功能改变，同时使得细胞内高钾和细胞外 高钠的离子浓度发生改变。目前研究还发现ALS患者运动神经元钠离子内 向电流的增加，其机制主要与持续性钠通道的表达上调和(或)该通道功 能异常相关，而内向钠离子电流增大直接导致了运动神经元较易爆发动作 万方数据 中文摘要 电位从而增加了能量的消耗和自由基的产生。 氨酸的衍生物。由于其小的分子量以及分子结构决定了易通过细胞膜，进 入细胞后脱乙酰基成为谷胱甘肽的合成的必须氨基酸，又称为还原型谷胱 甘肽的前体。NAC的主要功能一方面是维持细胞内氧化还原电势稳定， 另一方面还可以透过细胞膜及线粒体膜通过分子内结构清除细胞内的 ROS，成为一种有效的抗氧化剂。本实验通过应用不同浓度NAC作用于稳 定转染TDP．25运动神经元细胞后记录持续性钠电流，进一步分析NAC 目的：本实验研究目的是分别检测稳定转染TDP．25和空质粒的运动 神经元样细胞的持续性钠电流，并比较电流是否存在差别；分析不同浓度 N。乙酰半胱氨酸对稳定转染TDP一25运动神经元样细胞的作用。进一步探 究稳定转染TDP一25运动神经元样细胞的兴奋性增高与氧化损伤在ALS 发病机制中的作用。 方法：本实验应用稳定转染TDP一25和Em