硫氧还蛋白在糖病大鼠视网膜动态表达的实验研究.pdfVIP

四、 五、参考文献…………………………………………………………………………2l 六、附录 综j苤………····……··…··…………………·一·……”……·…·”…····………··22 在校期间科研成绩………………………………………………………………33 致谢……………····一··………………·····………………··……………………34 个人简介…………………………………………………………………………35 ·中文论著摘要· 硫氧还蛋白在糖尿病大鼠视网膜 动态表达的实验研究 目 的 糖尿病视网膜病变(diabetic 之一，目前认为氧化应激是DR发病机制中的一个关键环节。硫氧还蛋白系统 (thioredoxinsystem)是一个氧化还原敏感的多功能小分子蛋白系统，其既有强大的 抗自由基功能，又有促生长和抑制凋亡的作用。因此，硫氧还蛋白系统可能成为氧 化应激相关疾病的治疗新策略。糖尿病时糖脂代谢异常，DR发生发展过程中伴有 大量自由基的生成，推测TⅨ作为重要的抗氧化蛋白，可能也参与了细胞损伤和 凋亡的发生。我们通过构建糖尿病动物模型，观察Trx在糖尿病大鼠视网膜中的表 达部位及动态变化规律，探讨Trx与DR发生发展的关系。 方法 健康雄性Sprague 大鼠糖尿病模型；对照组(NC)注射同等剂量的柠檬酸缓冲液。建模成功后．，分别 于4周、8周、12周各处死糖尿病组及正常对照组大鼠15只，采用HE染色法观 察视网膜形态学改变，采用免疫组织化学法检测Trx在各组鼠视网膜内的定位表 达，采用Real．timePCR测定视网膜TrxmRNA表达。采用SPSSl7．0统计软件对 数据进行分析，实验结果以Z±s表示。各组数据资料的方差齐性检验采用Levene 分析，检验结果方差不齐。组间比较采用Kruskal．WallisH检验，各组间多重比较 采用Nemenyi检验，P0．05时认为差异具有统计学意义。 娃 蟹 · 拿口7K 1、糖尿病组大鼠呈现明显多尿、多饮、多食，明显消瘦、弓背，精神逐渐 萎靡，毛皮污秽无光泽，早期多动，后期反应迟钝，血糖波动在较高水平 (l 6．7retool／L)。 2、视网膜形态学观察，糖尿病4周组与正常组相比较无明显改变；糖尿病8 周组视网膜节细胞层及内外核层细胞排列紊乱；糖尿病12周组可见视网膜节细胞 层及内核层水肿，细胞排列紊乱。 3、免疫组织化学结果显示，正常组与糖尿病组大鼠视网膜神经纤维层、神 经节细胞层、内核层有Trx阳性表达，表达位于细胞浆。 4、Real-timePCR结果显示正常大鼠视网膜有TrxmRNA的表达，NC4wk、 NC 8wk、12wk)，DM组与NC组相比视网膜组织TrxmRNA表达下降(PO．05)。 DM组大鼠视网膜组织TrxmRNA表达在第4周下降，第8周、第12周逐渐升高， 至第12周时仍未达到正常水平，第4周与第12周相比差异有统计学意义(P=O．00)。 结论 1、在糖尿病动物模型下，视网膜形态学明显改变在患病后8周即可发生。 2、Trx明显表达于视网膜神经纤维层、神经节细胞层、内核层细胞。 3、Trx mRNA在糖尿病时表达降低，糖尿病4．12周表达逐渐升高，至12 周达到峰值。 关键词 糖尿病视网膜病变；硫氧还蛋白；氧化应激 2 ·英文论著摘要· ofthe of ExperimentalStudy DynamicExpression Rats ThioredoxinintheRetinaofDiabetic